c—myc与pten蛋白表达在宫颈癌中临床意义

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1、c—myc与PTEN蛋白表达在宫颈癌中临床意义【摘要】目的探讨宫颈癌组织中C-myc和PTEN蛋白表达的临床意义。方法应用免疫组化PV-9000两步法检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)及正常宫颈组织中C-myc和PTEN的表达。结果C-myc蛋白在宫颈癌中表达明显高于CIN和正常宫颈组织(P0.05)；PTEN蛋白的表达率在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌中逐渐下降(P0.05)；C-myc和PTEN蛋白的表达呈负相关(r=-0.484,P=0.000)o结论C-myc和PTEN与宫颈癌的发生、发展可能相关，二者联

2、合检测可能为宫颈癌的早期诊断和治疗提供一定的理论依据。【关键词】宫颈癌；C-myc；PTEN；免疫组织化学宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率位于第二位，早期诊断一直是人们关注的焦点。肿瘤的发生是一个复杂的过程。其中，癌基因的激活及抑癌基因的失活是肿瘤形成的基础。癌基因C-myc是myc基因家族的一员。C-myc蛋白的过表达发生于人类多种肿瘤。PTEN蛋白是一种肿瘤抑制基因，主要是通过促进肿瘤细胞的凋亡而在肿瘤的发生、发展中起重要作用。有关C-myc和PTEN蛋白的表达在宫颈癌发生、发展及相关性的研究尚

3、少见报道。本研究应用免疫组织化学技术，分别检测了C-myc和PTEN蛋白在宫颈癌组织中的表达，并研究二者与临床病理特征之间的关系，为宫颈癌的早期诊治提供有用的理论依据。1资料与方法1.1病例资料所有标本均选自本院2009年12月到2011年12月间手术切除或门诊活检标本共130例。宫颈癌标本70例，年龄28-74岁，中位年龄48.4岁，术前均未进行放、化疗及内分泌治疗。按病理学类型分为：宫颈鳞癌60例，腺癌10例。按组织学分级：高中分化48例、低分化22例。依据2009年FIG0临床分期标准：I期20例、II期4

4、0例、III期及以上10例。宫颈上皮内瘤样病变（CIN）40例和正常宫颈组织20例作为对照。其中CIN包括：I级15例，II级15例，III级10例。所有标本均由两位以上病理医师确诊。1.2试剂鼠抗人C-myc单克隆抗体（稀释浓度1:100）；兔抗人PTEN单克隆抗体（稀释浓度1：100）；PV-9000免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒。1.3方法采用免疫组织化学PV-9000两步法：切片（4um）〜脱蜡〜高压抗原修复〜自然冷却~3%H202内lOmin（灭活内源性过氧化物酶）一滴加抗体（C-myc、PTEN）-

5、*4°C冰箱过夜一PBS液冲洗5min-3次后，滴加试剂1（聚合物辅助剂）,37°C温箱内孵育20minf重复PBS液冲洗，滴加试剂2（辣根酶标记羊抗鼠IgG多聚体），37°C温箱内孵育30min—重复PBS液冲洗5min—3次—DAB显色—蒸憎水冲洗-*苏木精复染-*乙醇脱水f二甲苯透明、中性树脂封片。每批均设已知阳性切片作对照，用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。1.4结果判定C-myc蛋白阳性表达产物定位于细胞核，PTEN蛋白阳性表达产物位于细胞浆，均呈棕黄色颗粒。由两位以上病理医师采用双盲法观察每张切片：每

6、张切片随机选取5个高倍视野(X400),共计数1000个细胞。按染色细胞的百分比评分(A)：染色细胞未见为0分，50%为3分；按染色深浅度评分(B)：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。(A)X(B)记为阳性标记指数(labelindex,LI),并通过LI判断表达强度：0分为阴性(-),1-3分为弱阳性(+),4-6分为中等阳性(++),7-9分为强阳性(+++)。1.5统计学处理采用SPSS17.0统计软件进行数据分析处理，各组间率比较采用x2检验，分析C-myc>PTEN蛋白间关系采用Sp

7、earman秩相关分析。P0.05)；PTEN蛋白的表达在淋巴结转移及临床分期组间差异均有统计学意义(P0.05)。见表2。2.3C-myc和PTEN蛋白在宫颈癌中表达的相关性在70例宫颈癌中，C-myc和PTEN蛋白同时表达阳性的例数11例，同时表达阴性的例数5例，应用Spearman相关分析C-myc和PTEN蛋白的表达呈负相关(r=-0.484,P=0.000)o见表3。3讨论C-myc基因是myc基因家族成员之一，主要功能是参与肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡［1］。它是一个原癌基因，定位于8q24区，是近年来

8、分子生物学研究的一个热点。C-myc蛋白的过表达参与人类多种肿曆的形成。PTEN基因定位于10q23.3区，参与细胞周期调控、诱导凋亡、细胞的粘附和转移［2］。它的功能是具有PTPs（蛋白质酪氨酸磷酸酶）活性［3］,可通过拮抗PTKs（酪氨酸蛋白激酶）抑制肿瘤细胞的生长，从而起到抑瘤作用。因此，联合研究C-myc和PTEN蛋白可能为肿瘤的预防、早期诊断和治疗起到指导作用。