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《转pvpgip2基因小麦的获得与纹枯病抗病性鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、转PvPGIP2基因小麦的获得与纹枯病抗病性鉴定王金凤1,2，李钊2，杜丽璞2，黄素萍1,2，徐惠慧君2，冯斗1，张增艳2*（1广西大学农学院,南宁530004;2中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部麦类作物生物和遗传改良重点实验室,北京100081）摘要:多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种植物防卫蛋白，可阻止一些病原真菌的侵害。本研究克隆出扁豆PvPGIP2基因编码序列，构建了受玉米泛素(ubiquitin)启动子控制的PvPGIP2基因表达载体pA25-PvPGIP2；采用基因枪法将pA25-PvPGIP2转化小麦推广品种扬麦18幼胚愈
2、伤组织4000块，获得了203株再生植株。PCR检测出阳性植株65株，转化率为1.625%。对转PvPGIP2基因小麦T1-T2代植株，进行外源基因的PCR、RT-PCR、荧光定量RT-PCR(Q-RT-PCR)分析和小麦纹枯病抗性鉴定。结果表明，转入的PvPGIP2能够在转基因小麦中遗传、转录与表达；PvPGIP2基因的表达提高了转基因植株对小麦纹枯病的抗性。关键词：PvPGIP2基因；转基因小麦；小麦纹枯病；抗性DevelopmentandCharacterizationofPvPGIP2TransgenicWheatPlantswithEnhancedResistancetoRhiz
3、octoniacerealis（1CollegeofAgronomy,GuangxiUniversity,Nanning,Guangxi530004;2NationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement/KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementofTriticeaeCrops,MinistryofAgriculture/InstituteofCropSciences,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100081）Abst
4、ract：Polygalacturcuase-inhibingproteins(PGIPs)aredefenseproteinsproducedinplants,whichcaninhibitthegrowthofpathogenicfungi.Inthisstudy,thecodingsequenceofthebeanPGIPgenePvPGIP2wascloned,anditstransformationvector,pA25-PvPGIP2,wasconstructed,inwhichtheexpressionofPvPGIP2wasdrivedbythemaizeubiquitin
5、promoter.Atotalof4000embryocallusofwheatvarietyYangmai18werebombardedbytheparticlecontainingpA25-PvPGIP2,and203regeneratedplantswereobtained.ByPCRspecifictothetransgene,65positivetransgenicplantswereidentifiedintheT0generation,thusthetransformationfrequencywas1.625%.ThetransgenicwheatplantsinT1-T2
6、generationsweresubjectedtoPCR,RT-PCR,andQ-RT-PCRanalyses,anddiseaseresistanceevaluationfollowinginoculationswithRhizoctoniacereali.TheresultsshowedthattheintroducedalienPvPGIP2geneinthesetransgenicwheatplantscouldbeinherited,andexpressedinthewheatplantscouldbeinheritedandexpressedinthewheatbackgro
7、und.收稿日期：基金项目：国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08002-001，2009ZX08002-006B)作者简介：王金凤，硕士研究生，主要从事小麦抗病分子育种研究；通讯作者:冯斗，副教授，主要从事作物遗传育种和基因工程教学与研究；张增艳,研究员，博士生导师，主要从事小麦抗病分子生物学与分子育种研究，E-mail:zhangzy@mail.caas.net.cnThetransgenicwhea
