铁皮石斛种苗不同部位抗氧化酶活性的差异

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1、铁皮石斛种苗不同部位抗氧化酶活性的差异　　摘要：分析铁皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）种苗根、茎、叶抗氧化酶SOD、POD、CAT的活性变化。结果表明，铁皮石斛种苗的根、茎、叶SOD酶活性大小顺序依次是茎>根>叶，POD活性大小顺序依次是根>茎>叶；而CAT活性大小顺序依次是叶>根>茎；不同部位的不同抗氧化酶的活性变化不同。推断根和茎生长过程中起抗氧化作用的关键酶是SOD与POD，而叶的生长过程中起抗氧化作用的关键酶是CAT。　　关键词：铁皮石斛（Dendrobium

2、officinaleKimuraetMigo）；部位；抗氧化酶　　中图分类号：Q945.78；S567.5文献标识码：A文章编号：0439-8114（2016）19-5081-02　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.19.047　　Abstract：TheantioxidantenzymesSOD，POD，CATactivityofroots，stems，leavespartsofDendrobiumofficinaleKimuraetMigoseedlingsw

3、ereanalysed.TheresultsshowedthatthesizeofSODactivityofDendrobiumofficinaleKimuraetMigoseedlingsroot，stemandleafpartsfollowedbystem>root>leaf，PODactivitysizefollowedbyroot>stem>leaf，andCATactivitysizefollowedbyleaf>root>stem.Antioxidantactivityofdifferentenz

4、ymesindifferentpartsweredifferent.Thekeyenzymeinrootandstem6growthprocessplayedantioxidantmaybeSODandPOD，buttheleavesofthegrowthprocessintheantioxidantenzymesmaybeCAT.　　Keywords：DendrobiumofficinaleKimuraetMigo；differentparts；antioxidantenzyme　　植物在生长代谢过程中产生

5、的活性氧（ROS）对植物自身有着潜在的毒性，而其抗氧化酶系统可有效清除活性氧，增强植物的抗逆性，提高植物自身对外界的适应能力，有利于植物的生长[1]。兰科石斛属植物铁皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）位居“九大仙草”之首，可用于治疗热病伤津、口干烦渴等多种病症[2-4]。现代药理学研究结果显示，铁皮石斛有抗氧化、提高免疫力、抗肿瘤、降血糖等多种作用，由于野生品种的不断减少，组培、栽培技术的研究逐渐得到重视[5，6]。鉴于抗氧化酶系统具有重要意义，本试验对铁皮石斛种苗生长

6、过程中不同部位的抗氧化酶活性进行测定，以期为铁皮石斛的组培及高产栽培技术的研究提供必要参考。　　1材料和方法　　1.1材料　　采用栽培了8个月的铁皮石斛种苗，选自江西中医药大学药学院组织培养实验室，经江西中医药大学张寿文教授鉴定为兰科植物铁皮石斛。　　1.2方法　　取同一育苗盆中的铁皮石斛种苗6份，将其根、茎、叶分开，比较铁皮石斛不同部位抗氧化酶活性。再分别取不同组别的叶片（植株从顶端往下第3、4片叶子）进行抗氧化酶活性测定。6　　酶液制备：取材料1g，加入4mL预冷的磷酸缓冲液（PBS，0.07mol/LK

7、H2PO4与0.07mol/LNa2HPO4?15H2O按3∶7的比例混合，pH7.2）提取，冰浴条件下研磨成匀浆，4℃条件下，10000r/min离心10min，所得上清液即可用于超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性测定。　　1）超氧化物歧化酶（SOD）活性测定：采用SOD抑制氮蓝四唑（NBT）在光照条件下的还原作用来测定SOD活性[7]。　　2）过氧化氢酶（CAT）活性测定：参照李仕飞等[8]的方法，并略做改动，通过直接测定H202的减少量来表示过氧化氢酶的活性。　　

8、3）过氧化物酶（POD）活性测定：参照王伟玲等[9]的方法，并略有改动，根据过氧化物酶氧化愈创木酚的生成物的量来测定。　　2结果与分析　　2.1铁皮石斛不同部位3种抗氧化酶活性比较　　铁皮石斛不同部位抗氧化酶活性的比较结果见表1。不同部位的SOD活性不同。根、茎、叶部位的SOD活性大小顺序依次是茎>根>叶，分别为76.892、76.198、52.643U/g；不同部位POD活性大小顺序依次是根>茎>