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时间:2019-01-05
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1、洗发水对蚕豆根尖细胞的遗传毒性研究摘要运用蚕豆根尖细胞微核技术,以微核千分率和污染指数作为指标,研究洗发水对蚕豆根尖细胞的遗传毒性效应。洗发水対蚕豆根尖进行污染处理后,通过观察微核的形态,记录微核的数目,测定蚕豆根尖细胞的微核率,并且在实验中以未经污染处理的蚕豆根尖作为对照,来比较测定该洗发水的毒性•该洗发水具有轻度伤害,利用蚕豆根尖微核技术对其污染效应进行监测和评价既简便又比较可靠。AbstractUsingofbroadbeanroottipcellsbymicronucleartechnologyjnmicronucleusrateofmicrome
2、terandpollutionindexastheindex,studytheliquidshampoosolutiontoxicitytothecellsofbroadbeanroottipeffects・Liquidshampoosolutiontopollutionofthebroadbeanroottip,byobservingthemicronuclearmorphology,recordthenumberofmicronucleus,determinationofbroadbeanroottipcellmicronucleusrate,andi
3、ntheexperimentwithbroadbeanroottipwithoutpollutionbycontrast,incomparisontodeterminethetoxicityofthewashingpowder.Thelaundrypowdersolutionwithminimaldamage,theuseofbroadbeanroottipmicronucleartechnologiesformonitoringandevaluatingthepollutioneffectissimpleandreliable.关键词蚕豆微核实验洗发水核
4、变界引言微核(Nicronucleus,MCN)是真核生物细胞中的一种异常结构,它是由于细胞受到损伤后,由细胞分裂过程中丧失着丝粒的染色体断片或落后染色体产生的。这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后,在分裂末期不能进入主核,便形成了主核之外的核块。蚕豆根尖细胞微核技术已发展的相当成熟,具有较高的灵敏性和可能性,作为检测化学品遗传毒性的方法,得到了广泛应用[1-2]。而且在测定监测淡水污染物和检测化学诱变剂的研究已列入国家生物监测技术规范(水环境部分),并推广应用于大气、废水、土壤等的致突变活性检测[3]。但冃前关于检测食物的诱变活性报道较少。洗发水作为一种
5、速食小吃早已被人们接受,但其洗发水中的—•些成分会在食用过程中渗透到血液中,导致人体细胞的染色体畸变。此外,含洗发水的废水排出后,会造成水环境方而的污染。因此,本文以蚕豆根尖作为实验材料,来探讨洗发水的遗传壽性,旨在为其存在的隐患提供一个参考依据。1、材料与用品1.1实验材料:蚕豆1.2实验器材和试剂显微镜、试管、蚕豆培养盆、纱布、毛山、三角瓶、载玻片、盖玻片、溶有洗发水洗发水的水、卡诺氏固定液(用乙醇和冰醋酸以3:1(v/v)混合配制)、盐酸(lmol/L);Giemsa染液2、实验方法2.1浸种按实验需要选収大小均匀、饱满的蚕豆种子30粒,直接放入盛水
6、的塑料盆中,在常温下浸泡1天,期间要注意换水。2.2催芽待种了吸胀后,用潮湿的纱布松散包裹置于盆屮,纱布上载盖一层湿水的毛巾,催芽约1—2天。2.3处理根尖选取初生根生长良好的种子,放入盛有被测液的纱布屮,进行根尖处理。另一些继续清水培养(作为对照组)。2.4根尖细胞恢复培养处理后的种子用白來水浸洗,洗净后再置入潮湿纱布小,再恢复培养一天左右。2.5取材、制片2.5.1固定将恢复后的种了,从根尖顶端切下lcm长的幼根,用卬醇:冰醋酸(3:1)液固定24小时。2.5.2解离用蒸懈水浸洗固定好的幼根,吸净蒸镭水,加入6mol/L盐酸将幼根浸没,室温下酸解10分
7、钟,幼根软化即可。2.5.3染色吸去盐酸,用蒸憎水浸洗幼根三次,每次1〜2分钟。滴加染液,染色20〜30分钟,截下1〜2mm左右长的根尖,加盖玻片,压片观察。3、结果记录及处理首先在显微镜低倍镜下找到分散均匀的分生区组织细胞,分裂相较多的部位,再转至高倍镜F进行观察。微核识别的标准:①微核人小在主核1/3以下,并与主核分离;②小核的着色与主核-致或稍浅;③小核形态呈I员1形、椭圆形或不规则型。每一处理观察3个根尖,每个根尖数1000个细胞,统计其中含微核的细胞数,然后平均,即为该处理的MCN%,即微核千分率,以其作为指标按下述公式测出水样的污染指数,计算各
8、测试样站(包括对照组)微核千分率(MCN%0),采用“污染指数”判
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