rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究

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1、Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究建议改为：Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究肖正华1，2，高一萌1，彭慧娟１，张　瑜１，罗淑娟１，令狐华１*（400016重庆，重庆医科大学：附属第一医院妇产科１，附属永川医院妇产科２）[摘要]目的探讨卵巢浆液性癌组织中Rap1蛋白表达及其在浆液性癌细胞增殖中的作用。方法通过Westernblot检测并比较Rap1在浆液性卵巢癌组织、卵巢良性组织和正常卵巢组织中的表达；应用RNA干扰技术构建3个RaplshRNA真核表达载体，将3个重组质粒、空质粒、阴性质粒分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3，通过We

2、sternblot对重组质粒进行有效性筛选，G418筛选建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株；MTT法检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化以分析Rap1蛋白表达在浆液性癌细胞增殖中的作用。结果与卵巢良性组织和正常卵巢组织相比，浆液性卵巢癌组织中Rap1呈现高表达（P<0.05）。经双酶切和DNA测序证实成功构建了3个重组质粒pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#1，-Rap1i-#2，及-Rap1i-#3；瞬时转染提示上述3个质粒的Rap1抑制效率分别是50%、66%、19%，遂最终采用pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1

3、i-#2转染并用G418筛选出单克隆细胞Rap1i-1和Rap1i-2，其Rap1蛋白抑制率分别为70%和48%，我们选取Rap1i-1细胞进一步检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化，发现其增殖能力较对照组更强（P<0.05）。结论Rap1蛋白表现出对增殖的抑制作用，其在浆液性卵巢癌中呈高表达的意义待进一步探讨，其在卵巢癌组织中高表达的意义需进一步探讨。[关键词]浆液性卵巢癌；Rap1；肿瘤增殖ThedetectionofRap1expressionanditsinhibitoryroleinthecell proliferation inserousovarian

4、cancerXiaoZhenghua1，2,GaoYimeng1,PengHuijuan1,ZhangYu1,LuoShujuan1,LinghuHua１*(1DepartmentofObstetricsandGynecology,theFirstAffiliatedHospital,2DepartmentofObstetricsandGynecology,YongchuanHospital,ofChongqingMedicalUniversity,400016,China)请按我刊格式补充作者和单位的英文信息[Abstract]ObjectiveToinvestigatethe

5、Rap1expressionanditsroleinthemalignantgrowthinserousovariancancer.MethodsRap1expressionwasevaluatedthroughwesternblotanalysisinserousEOCtissues,benignovarianadenomatissuesandnormalovariantissues.ThreeRaplshRNAeukaryoticexpressionvectorswereconstructedwithRNAinterferencetechnology.Threerecombi

6、nantplasmids,emptyvectorandnegativeplasmidweretransfectedintoovariancancercelllineSKOV3throughLipofectamine2000，thenidentifiedbyrestrictionendonucleasedigestionandDNAsequencing.TheRap1siRNAefficiencywasprovedthroughmonoclonalscreeningwithG418followedbywesternblot.TwostrainsofSKOV3-Rap1-RNAice

7、lllineswereestablished.AndmalignantproliferationwasevaluatedbyMTT.ResultsEOCtissuespresentedwithsignificantlyhigherRap1expressionthanbenignovariantumorsandnormalovariantissues（P<0.05）.PSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#2wasprovedthemostefficientthro