maspin真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株sgc7901增殖的影响

《maspin真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株sgc7901增殖的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、郑爱华,等.MASPIN真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响文章编号:1000-5404(2008)--04论著MASPIN真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响郑爱华，易永芬，周文文（重庆医科大学病理学教研室,重庆400016）基金项目：重庆市教委资助项目(.040310)作者简介：郑爱华，女，重庆市人，硕士研究生，主要从事消化系统肿瘤病理方面的研究。电话：13271601982，E-mail:zhengaihua2000@yahoo.com.cn通信作者：易永芬，电话：（02

2、3）68012697，E-mail：yiyongfen1953@yahoo.com.cn摘要：目的构建MASPIN真核表达载体，分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901的影响。方法PCR扩增MASPIN基因全长，用载体PCR2.1构建重组质粒，转染至胃癌细胞株SGC7901。RT-PCR、Westernblot检测MASPIN基因表达变化，MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞仪（FCM）分析细胞周期，观察过表达MASPIN对SGC7901细胞株的影响。结果成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体并转染至胃癌细胞

3、株SGC7901，转染上调了SGC7901细胞株MASPIN在mRNA、蛋白水平的表达。转染MASPIN的SGC7901细胞增殖率随时间而减慢，第24、48、72小时的细胞增殖率分别为93.07％、81.97％、66.5％，明显低于转染空载体组（95.98％、95.79％、95.59％，P＜0.05）。与转染空载体组相比，过表达MASPIN的SGC7901细胞株在G0/G1期所占比例明显提高（70.3％vs55.6％），S期细胞减少（19.8%vs34.9％，P＜0.05）。结论成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体

4、，过表达MASPIN可抑制SGC7901细胞株的增殖。关键词：胃肿瘤；SGC7901细胞；MASPIN；增殖中图分类号：R735.2文献标识码：AConstructionofaEukaryoticvectorexpressingmaspinGeneandItseffectonproliferationofgastriccancercelllineSGC7901ZhENGai-hua,YIyong-fen,ZHOUwen-wen(DepartmentofPathology,ChongqingMedicalUniversit

5、y,Chongqing400016,china)Abstract:ObjectiveToconstructtherecombinanteukaryoticvectorexpressingmaspincDNA,andexploretheeffectofmaspinoverexprssionontheproliferationofhumangastriccarcinomacellsSGC7901.MethodThefragmentofmaspingenewasamplifiedbypolymerasechainreactio

6、n(PCR).Aeukaryoticvectorexpressingmaspin(maspin/PCR2.1)wasconstructedwithPCR2.1,andtransfectedintotheSGC7901.TheexpressingofmaspinwasdetectedbyRT-PCRandWestern-blot.TheproliferationofSGC7901cellswasobservedbyMTT.Cellcyclewasanalyzedbyflowcytometry(FCM).ResultsRec

7、ombinantplasmidmaspin/PCR2.1wasconstructedandtransfectedintoSGC7901successfully.ThemRNAandproteinlevelofMASPINweresignificantlyhigherintheMASPIN/PCR2.1group(33.62±1.2,23.36±1.6)thanthatinthePCR2.1（15.01±1.5、12.32±1.5）andtheuntreatedgroup(13.72±2.0、12.01±1.3，P＜0.0

8、5).theproliferationofSGC7901cellswassignificantlylower(93.07％、81.97％、66.5％)intheMASPIN/PCR2.1groupthaninthePCR2.1group(95.98％、95.79％、95.59％，P＜0.05)at24h、48h、72