重医临床免疫重点整理

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1、抗原抗体反应的原理：l.Ag、Ab能特异性结合：（内因）2.Ag、Ab结合的动力：（外因）静电引力（又称库仑引力）范得华力（又称电子云力）氢键、疏水作用力。抗原抗体反应的特点：2.特界性、交义反应（cross・reaction）2.最适比例3.可逆性影响抗原抗体反应的主要因素自身因素：Ag：与Ag的理化性质、抗原表位的数冃及种类有关；Ab：与Ab的来源有关：是R型抗体或H型抗体；与Ab的特异性、亲合性有关；与Ab的浓度有关。外界环境条件：1.电解质2.PH3.温度抗原抗体反应分哪些种类？沉淀反应；凝集反应；补体参为的溶血反应、补体结合试验：中和试验;三大标记技术什么是交叉反应，有无特异

2、性，为什么？在临床上有何意义？交叉反jS（cross-reaction）-—Jjl体对具有相同或相似抗原表位的抗原发生的反应称为交叉反应。交叉反应并没有违背Ag、Ab特异性结合的原则，其产生的先决条件是存在共同Ag表位。交叉反应的意义：1.免疫学诊断：（利用交叉反应）eg外斐氏反应等:利用变形杆菌0X19、0X2、OXk作Ag检查血清中Ab,诊断斑疹伤寒（立克次氏体感染所致）2.可造成免疫病理损害：eg链球菌感染后易导致肾小球肾炎，其原因为链球菌与人体肾小球基底膜有共同的Ag表位所致。双扩、单扩、对流免疫电泳、免疫电泳实验的原理，方法，用途。凝胶扩散试验原理：可溶性抗原与相应抗体在电解

3、质存在下，在琼脂基质中扩散，当两者相遇，比例恰当时结合，出现肉眼可见的沉淀线。双扩，方法：制备琼脂板、打孔、加样、扩散、用途：1.已知Ag或Ab测未知Ab或Ag:双孔型2.抗原性质分析：三角孔型3.测Ag有效稀释度：梅花孔型。单扩：方法:已知抗体+琼脂混合制板、打孔,在琼脂板小孔中加梯度抗原,抗原向四周扩散形成沉淀环，抗原浓度与沉淀环肓径呈线性关系绘制标准曲，从标准曲线上杳出并计算待测标木含:H。用途：定：S测;E口J测IgG^IgA、IgM^C3等含坦:。对流免疫电泳（counter-immunoelectrophoresis）原理：定向加速的免疫双扩（双扩+电场，使抗原、抗体相对泳

4、动）方法：抗原、抗体分別在琼脂板上不同孔内，抗原在负极端，抗体在正极端，电泳。电压：4〜6v/cm（琼脂长度）电泳时间：45分钟〜1小时。用途用于HBsAg、AFP等检测。免疫电泳（immunoelectrophoresis）jfe理：区带电泳+双扩结合。方法：l.Ag电泳分出区带（当时看不到）2.Ag、Ab免疫双扩。用途：常用于分析复杂Ag的组分。（如人全血清组分的分析）影响电泳的因素有哪些？1.L溶液的pH有关：常用pH8〜9,蛋白质带负电2.L溶液离子强度冇关：愈高，泳动慢，一般0.02~0.2M3.与电场强度冇关：愈高，愈快，一般4〜6v/cm（琼脂长），约40v左右4.电渗作

5、川的影响：电场屮液体对于一固体的固定相对移动的现象。电渗方向与电泳方向相反。Ab沉淀素（precipitin）。沉淀反应稀释ag,凝集反应稀释ab。Ag凝集原agglutinogenAb凝集素agglutinin玻片凝集试验和试管凝集试验的区别玻片法用C知抗体检测未知抗原。定性试验。用途：ABO血型鉴定、菌种鉴定。试管法川己知抗原测未知抗体的效价。属半定量试验。反向间接凝集试验、间接凝集抑制试验的原理及实例：反向间接（血、胶乳）凝集试验。原理：将已知抗体吸附于载体上，检测未知抗原。如：反向间接血凝检测HBsAg、AFP等间接凝集抑制试验原理：待测样木（可溶性Ag?）+已知Ab,反应一段

6、时间后，+己知致敏Ag颗粒（已成为颗粒性Ag）,观察是否有凝集现象。不凝集为阳性，凝集为阴性。如：用胶乳凝集抑制试验检测小便中绒毛膜促性腺激素（HCG）协同凝集试验的原理原理:实质为反向间接凝集反应葡萄球菌A蛋H（StaphylococcusproteinA,SPA）能非特异地与IgG的Fc段结合，当与特异性抗原相遇时，IgG的Fab段与抗原结合，出现金葡菌的凝集现象（属特殊间接凝集试验）比较沉淀试验和凝集试验的异同抗原性质：可溶性Ag、颗粒性Ag。稀释对象：抗原、抗体。结果现象：沉淀现象、凝集现象。敏感性：低、高。免疫血清制备的主要程序。（一）动物的选择：1.常用动物：哺乳类较多：马

7、、羊、猪、猴、兔豚鼠等：禽类：鸡。2.选择原则：免疫的Ag与动物的种类要求越远越好（即免疫原性好）;与免疫血清的量有关：所需量大，用马、羊、猴等大动物；所需量小，用兔、豚鼠等小动物动物的个体状态：雄性、适龄、健康、无感染；其它：根据实验的特殊要求。（二）抗原的条件：具有良好的抗原决定簇（表位）：易被LC识别而产生Ab；具有可靠的纯度；足够人的分子量及相对复杂的空间结构；注射量：严格掌握。宁可小，一般用25Mg/kg动物；量大可出现免;殳抑制佐剂