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1、外来化合物对细胞生理代谢的影响一急性Znc12染毒对小麦幼苗SOD活力影响学院：专业：年级：级姓名：学号：指导老师：外来化合物对细胞生理代谢的影响一急性Znc12染毒对小麦幼苗SOD活力影响生命科学学院级专业姓名：学号：指导教师：摘要：本实验以小麦幼苗为实验对象，从毒性的氧化损伤出发，测定染不同浓度的Zncl2（浓度依次为100mg/L.200mg/L.400mg/L.800mg/L和1600mg/L）后小麦幼苗茎叶组织中的SOD的活性变化，来讨论ZnCL对小麦幼苗茎叶组织SOD酶活性的影响，为研究细胞分子水平毒性机制提供科学依据。Znc12浓度为100
2、mg/L与Zncl2浓度400mg/L.800mg/L及1600mg/L相比,SOD酶活的差异极显著,说明Zncl2浓度为100mg/L与其他三个浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响差异极大。当Znc12浓度分别为100mg/L.200mg/L时,与对照组相比，SOD酶活的差异显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响明显。当Znc12浓度分别为400mg/L,800mg/L时，SOD酶活的差异不显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响不明显。本实验说明不同浓度的Zncl2对小麦幼苗SOD酶的活性的影响不同。且对ZncL影响SOD酶的活性的机制进行了简单分析
3、。关键词：外来化合物细胞生理代谢影响急性Znc12染毒小麦幼苗SOD活力超氧化物歧化酶Orgotein（SuperoxideDismutase,SOD）,另!j名肝蛋白、奥谷蛋白，简称：SODoSOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。它广泛存在于生物体的各种组织中,能清除白由基。2（超氧阴离子自由基），而02具有细胞毒性，可使脂质过氧化，损伤细胞膜,引起炎症，肿瘤和自身免疫性疾病，并可能促使机体衰老。在生态系统中，Zn是生物的多种生命代谢活动的重要参与者，生物对Zn的需求大
4、体保持着动态平衡，但当Zn的浓度超出生态系统所能承受的容量或“弹性限度”时，整个生态系统的生物生产量就会受到影响，并直接或问接地危害人类的生命和健康。Zn的不足和过量均会使动植物出现生理代谢紊乱。植物Zn含量超过50mg/kg时往往会发生Zn中毒，大量Zn在根部积累，使根系吸收K受到抑制，从而造成生长不良，其至死亡。1实验材料与方法1.1实验材料小麦幼苗0.05niol/LpH7.0PBS缓冲液SOD试剂盒冰醋酸6个不同浓度Zncl2溶液（Omg/L,100mg/L,200mg/L,400mg/L,800mg/L,1600mg/L）1.2实验仪器冷冻离心
5、机分光光度计分析天平恒温水浴锅冰浴微量移液器（50uL,100PL）研体离心管一次性塑料管纱布粗滤纸1.3试验方法1.3.1Zncl2染毒处理实验及粗酶提取液的制备小麦浸种5〜6h,萌发24〜36h后将露白的种子随机摆放于培养皿中，40〜50粒/皿左右，生长5天后，分别用不同浓度的ZncL溶液处理8天后，在同一皿中随机取茎叶0.3〜0.5g（每一处理浓度中有4皿即4个重复），按1:10加入预冷的PBS液（1/2用于研磨，1/2用于清洗，小范围研磨，便于冲洗）剪碎，冰浴研磨，倒入离心管并用剩余的PBS液冲洗入离心管,混匀后8000rpm离心15min,上清
6、液即为10%的粗酶提取液，适当稀释后用于SOD酶活性的测定。1.3.2总SOD酶活测定总SOD酶活测定按表进行试剂测定管（4个）对照管SOD试剂11ml1ml2.5%粗酶提取液40uL蒸憾水40uLSOD试剂20.1ml0.1mlSOD试剂30.1ml0.1mlSOD试剂40.1ml0.1ml充分摇匀，置于37°C冰浴40min显色剂2ml2m1混匀.胃率温10min,于波长550nm处，1cm光径比色环，蒸憾水调零,比色，测定各管0D值说明：通过实验探索可知粗酶提取液量为40uL时最适宜。总SOD活力（U/P二对照管0D-测定管0D对照管0D-50%x
7、反应应液总体X样吊测试前的稀释倍数2结果与分析2.1不同浓度Zncb溶液处理小麦茎叶总SOD酶活性Zncl2浓度(mg/L)各重复的总SOD酶活力总SOD平均值土标准差12340（对照）1310.63930.131183.80887.851078.1025±202.75841001138.071286.521385.481484.441323.6275±147.7554200915.071098.081006.581143.831040.8925±101.4515400869.32457.53457.53594.79594.7925±194.119780
8、01084.421041.04607.27780.78878.3775±225.
