实验室啤酒发酵

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1、实验室啤酒发酵一、实验目的：熟悉静止培养操作，观察啤酒发酵过程，掌握发酵过程中一些指标的分析操作技能。二、实验原理：啤酒酵母将麦芽汁发酵，产生酒粹等发酵产物（啤酒）。三、实验器材：⑴.100升发酵罐。（2）.0〜10°BX糖度表。（3）.10°C・30°C可调生化培养箱。培养基：（1）.麦芽汁发酵培养M10Plato,50糖化制取。⑵.麦芽汁琼脂培养基：麦芽汁加2%琼脂，自然pH。⑶.麦芽汁液体培养基：酵母扩大培养用。菌种：啤酒生产用酵母菌株。四、实验步骤：（1）麦汁制备（2）酵母菌种分离纯化与质量鉴定（3）菌种扩大培养（4）啤酒主发酵：麦汁50TI

2、-,10°BX,lloC-＞接种量1.5X107个细胞/mL-主发酵,1TC,5〜7天f至4.0°BX时结朿（嫩啤酒）。在主发酵过程中，毎天测定下列项目：糖度、细胞浓度、出芽率、染色率、酸度、a•氨基氮、还原糖、酒粕度、pH、双乙酰。然后以时间为横坐标，这些指标为纵坐标，叠呦于方格纸上。（5）后发酵五、作业要求（1）.画岀发酵周期中上述上述指标的Illi线图，并解释它们的变化。（2）.记下操作体会与注意点。实验一协定法糖化试验一、实验目的：协定法糖化试验是欧洲啤酒酿造协会（EBC）推荐的评价麦芽质量的标准方法，我们用该法进行小最麦芽汁制备，并借此评价

3、所用麦芽的质量。二、实验原理：利用麦芽所含的各种他类将麦芽中的淀粉分解为对发酵性糖类，蛋白质分解为氨基酸（具体参见理论部分第二节）。三、实验器材和试剂：1实验室糖化器：由水浴和500〜600mL的烧杯组成糖化仪器，杯内用玻棒搅拌或用100°C温度计作搅拌器（此时搅拌应丁分小心，以免敲碎水银头）。实验时杯内液血应始终低于水浴液面。最好采用专用糖化器：该仪器有一水浴，水浴木身有电热器加热和机械搅拌装置。水浴上有4〜8个孔，每个孔内可放一糖化杯，糖化杯由紫铜或不锈钢制成，每一杯内都带有搅拌器，转速为80〜100转/分，搅拌器的螺旋桨直径几乎与糖化杯同，但又

4、不碰杯壁，它离杯底距离只有1-22口色滴板或瓷板，玻棒或温度计。3滤纸，漏斗，电炉。4碘溶液，0.02N：2.5克碘和5克碘化钾溶于水中，稀释到1000毫升。四、实验步骤1.协定法糖化麦汁的制备（1）取50g麦芽，用卅i物粉碎机将其粉碎。（2）在已知重量的糖化杯（500〜600mL烧杯或专用金属杯）中，放入50g麦芽粉，加200mL46〜47°C的水，于不断搅拌下在45°C水浴中保温30分钟。（3）使醪液以每分钟升温1°C的速度，升温加热水浴，在25分钟内升至70°C。此时于杯内加入100mL70°C的水。（4）70°C保温1小吋后，在10〜15分钟

5、内急速冷却到宗温。（5）冲洗搅拌器。擦干糖化杯外壁，加水使其内容物准确称量为450g。（6）用玻棒搅动糖化醪，并注于干漏斗屮进行过滤，漏斗内装有玄径20厘米的折叠滤纸，滤纸的边沿不得超出漏斗的上沿。（7）收集约100mL滤液后，将滤液返回重滤。过30分钟后，为加速过滤可用一玻棒稍稍搅碎麦槽层。将整个滤液收集于一干烧杯中。在进行各项试验前，需将滤液搅匀。2.糖化时间的测定（1）在协定法糖化过程中，糖化醪温度达70°C时记录时间，5分钟后用玻棒或温度计取麦芽汁1滴，置于白滴板（或瓷板）上，再加碘液1滴，混合，观察颜色变化。（2）每隔5分钟重复上述操作，直

6、至碘液呈黄色（不变色）为止，记录此吋间。山糖化醪温度达到70°C开始至糖化完全无淀粉反应时止，所需时间为糖化时间。报告以每5分钟计算：如<10分钟10〜15分钟15〜20分钟等正常范用值浅色麦芽：15分钟内深色麦芽:35分钟内1.过滤速度的测定以从麦汁返回重滤开始至全部麦芽汁滤完为止所需的时间來计算，以快、正常和慢等來表示，1小时内完成过滤的规定为“止常”，过滤时间超过1小时的报告为“慢”。2.气味的检査糖化过程中注意糖化醪的气味。具有相应麦芽类型的气味规定为“正常'，因此对深色麦芽若有芳香味，应报以“正常”；若样品缺乏此味，则以“不正常”表示，其它

7、界味亦应注明。1.透明度的检查麦汁的透明度用透明、微雾、雾状和混浊表示。6・蛋白质凝固情况检查强烈煮沸麦芽汁5分钟，观察蛋白质凝固情况。在透亮麦芽汁中凝结冇大块絮状蛋白质沉淀，记录为“好若蛋白质凝结细粒状，但麦汁仍透明清亮，则记录为“细小若虽有沉淀形成，但麦芽汁不清，可表示为"不完全若没有蛋白质凝同，则记录为“无覽五、注意事项：粉碎最好用EBC粉碎机，若用1号筛粉碎，细粉约占90%,用2号筛粉碎细粉约占25%o对溶解度好的麦芽，建议用2号筛。因为细粉太多影响过滤速度。一般要求粗粒与细粒（包括细粉）的比例达1：2.5以上。麦皮在麦汁过滤时形成口然过滤层

8、，因而要求破而不碎。如果麦皮粉碎过细，不但会造成麦汁过滤闲难，而且麦皮小的多酚、色素等溶出量增加，会影响啤酒