10有关基因工程中的酶切问题

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1、有关基因工程中的酶切问题一、单选题：1.已知某种限制性内切酶在一线性DNA分了上有3个酶切位点，如图屮箭头所指，如果该线性DNA分了在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分了，

2、

3、

4、若在每个DNA分了上至少有1个酶切位点被该酶切断，则abCd从理论上讲，经该酶切示，这些线性DNA分了最多能产生rttlDNA分「的爸切示恋•图长度不同的D"A片段种类数是A.3B.4C.9D.122.现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分了，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切示得到的DNA分了仍是lOOObp,用Kpnl单

5、独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子,用EcoRKKpnl同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分了。该DNA分了的酶切图谱正确的是的EcoRlKpnlKpnlB.EcoRIKpnlEcoRIKpnlA.,600

6、200

7、2001600

8、200

9、200

10、EcoRIEcoRIC・EcoRI、D.rI6003.现有一长度为3000碱基对（bp）的线性DA分了，用限制性核酸内切酶酶切示，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图1；用酶B单独酶切，结果如图2；用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA分了的结构及其酶切图谱是（）2

11、QOObp2000bplOOObp800bp400lq»图1图21400bp—600bpS36004006001400B.4fi06D01400600D1.8kbBamHI1.0kl)0.9kl>0.3kl>Hindm+BamHI1.8kl)1.3kb0.9kl)4.在DNA测序工作屮，需要将某些限制性内切核酸酶的限制位点在DNA上定位，使其成为DNA分了屮的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶HindHI,BamHI和二者的混合物分别降解一个4kb（lkb即1T个碱基对）人小的线性DNA分了，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作

12、用下，降解产物分开，如右图所示。据此分析，这两种限制性内切核酸酶在该DNA分了上的限制位点数目是以下哪一纟R?A.Hindlll1个，BainHI2个B.HindIII2个，BamHI3个C.HindIII2个,BamHI1个D.Hindlll和BamHI各有2个二、填空题:1.图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp"为青霉素抗性基因，仇甘为四环素抗性基因，P启动了，T为终止了，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRKBeimHI在内的多种酶的酶切位点。据图冋答：（1）将含有目的基因的DNA与质粒

13、该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其屮由两个DNA片段之间连接形成的产物有、、三种。若要从这些连接产物屮分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行o（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核猪主细胞进行转化实验。之后将这些猪主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是:若接种到含青霉素的培养基屮能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是.（4）在上述实验屮，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是含有抗原

14、察因的染色休DZA川八PCRIllkyx图1转莘因操作流程图■•…引物对—・•SmaIAtoRl®淤：叭I②DNA>i-闸&uR1①AluII■■miniannul)XO细閑B细JWA质紋复制获.■…-得大駅押贝締迭符合象求的质rfYDNATRW引物对A.Pl厂zAACrGAAATGTAGCTATC♦■WHOAAAA/^T^/r^rT^AC11I1■J■CVr引物对B5152GTCCGACTAGTGGCTGTGAGCTGGCGTTTAGCCTCG引物对序列表表】表2儿种限制购识別序列及切割位点表限制駙AluIEcoRIPsiISmaI切割位点AG

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