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时间:2019-01-02
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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果荆州市疾病预防控制中心运行机制的探讨作者:魏丽珍温登瑰单保恩李巧霞梁文杰赵泽贞【关键词】水果【摘要】目的环境中的一些致癌致突变物常通过饮食进入体内,因此人们在减少环境污染的同时,提高饮食中的抗癌因素越来越受到专家学者的关注。为了进一步开发利用植物的新用途及研制保健品等,为肿瘤预防及肿瘤临床治疗提供参考。筛选了五种天然热带水果进行抗突变、致突变或抗癌、致癌同步试验研究。方法应用分子毒理学原理,采用SOS抗突变和致突变同步快速试验技术,进行了加与不
2、加大鼠肝脏微粒体酶系统的试验和重复试验。结果五种检品柠檬、芒果、火龙果、柚子及人参果均未显示对丝裂霉素C的致突变毒性,除芒果未发现抗突变性外,其他4种检品均显示不同程度的抗突变阳性,柠檬最强,为强阳性,柚子次之,火龙果和人参果均为弱阳性。结论柠檬、火龙果、柚子、人参果可能有减少肿瘤化疗药物远期潜在毒副作用的功能,并在预防肿瘤方面有一定作用。 关键词水果丝裂霉素CSOS试验抗突变课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研
3、究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果 日前随着临床抗肿瘤化疗药物的广泛使用,医源性致癌因素亦逐渐增多,化疗药物在治疗肿瘤的同时又增加了患第二肿瘤的危险性[1]。对一些可食性中药及蔬菜的抗诱变及抗肿瘤作用报道较多[2,3],而对天然热带水果抗突变及抗癌研究报道尚少。天然热带水果具有低糖、低脂、富含维生素及微量元素的优点,是深受国内外人士欢迎和喜爱的食品。丝裂霉素是临床常用的抗肿瘤化疗药物之一,故在我室以往研究的基础上,筛选了5种检品应用分子生物学原理进行了抑制MMC的SOS反应检测。利用SOS抗突变和致突变同步试验技术做了加与不加大鼠肝脏微粒体系统的抗突变与致突变作
4、用的试验及重复试验。 1试验材料 标本来源五种水果均购自石家庄北国超市鲜品。1.对照剂抗突变阳性对照剂为100mg/ml维生素C,石家庄制药集团生产;致突变阳性对照剂为/ml丝裂霉素,浙江海正药业股份公司生产;既不致也不抗突变对照剂为%生理盐水。混合液S9混合液中含2份S9原液和3份使用液,每皿加。使用液由15mmol/L、的磷酸盐缓冲液、3mmol/L的辅酶Ⅱ及10mmol/LMgCl组成。1.培养基制备课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意
5、义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果每升LB液体培养基中含蛋白胨10g,酵母粉5g,氯化钠5g,,每升半固体顶层琼脂中含琼脂6g,氯化钠,。每升底层营养琼脂培养基含营养琼脂粉41g,按说明书配制。以上3种培养基均经高压灭菌30min。1.标准试验菌株遇到诱变剂能产生SOS反应致细胞突变后释放噬菌体的菌株为大肠杆菌溶源性菌株GY5027,对该噬菌体敏感的指示菌株为GY4015,两菌株均由第二军医大学生物教研室提供,经鉴定符合病原生物学特性。 1.试验原理当GY5027菌株接触到致突变物致癌物即发生SOS反应造成基因突变释放出噬菌体,导
6、致对该噬菌体敏感的GY4015菌体溶解,出现肉眼可见的噬菌斑。 试验方法 菌种活化、处理课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果将GY4015及GY5027分别接种于1ml的LB液体培养基中,37℃恒温水浴振荡,培养15h。将GY4015及GY5027倒入无菌小离心管中,10000r/min,离心3min,弃去上清液,加入1ml的NS,混匀再次离心弃去上清液,再补充NS
7、至1ml混匀,取其10μl加到中混匀。将50ml半固体顶层琼脂加热融化后放入48℃恒温水浴中,30min后加入已处理的GY5027菌液50μl和GY4015菌液,迅速振荡混匀,取其3ml注入到营养琼脂底平皿上,铺匀待凝。加S9的试验即在加入3ml顶层琼脂的同时加S9混合液,并在冰盘上快速操作。.加检品及对照剂用无菌镊子取长7cm、宽的灭菌滤纸条沾MMC液贴于已含菌的平皿半固体表面直径线,取长、宽的无菌滤纸条分别沾NS、VitC、MMC对照剂及标本水溶液垂直贴于MMC条上,“+++”状。每皿贴三个检品条,
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