银屑病患者骨髓cfuhpp集落形成及集落细胞 p16基因启动子甲基化的研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果银屑病患者骨髓CFUHPP集落形成及集落细胞p16基因启动子甲基化的研究作者:张瑞丽,牛旭平,李新华,张开明,尹国华【摘要】本研究检测银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成单位的集落形成能力及集落细胞p16基因启动子甲基化状态,并探讨两者之间的关系。收集了24例银屑病患者及正常对照者骨髓,采用密度梯度离心法分离单个核细胞,并于含SCF/GMCSF/IL3/IL6细胞因子组合的甲基纤维素半固体培养液中,培养14天计数CFU

2、HPP集落,然后收集集落。提取纯化集落细胞的DNA,经亚硫酸盐修饰后,采用甲基化特异PCR检测CFUHPP集落细胞的p16基因启动子甲基化状态。结果发现:在甲基纤维素半固体培养基中,银屑病患者骨髓CFUHPP集落数显著低于正常对照,且集落形态较小;正常对照骨髓CFUHPP集落细胞的p16基因启动子甲基化阳性率较高,而银屑病患者骨髓CFUHPP集落细胞p16基因启动子甲基化阳性率低于正常人。结论:银屑病患者骨髓CFUHPP细胞集落形成能力降低;银屑病患者骨髓CFUHPP集落细胞的p16基因甲基化降低可能与其相对较低的CFUHPP集落形成能力密切

3、相关。【关键词】高增殖潜能集落形成单位CFUHPPColonyFormationofBoneMarrow课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果HematopoieticProginitorCellsinPsoriaticPatientsandMethylationofp1GenePromotorinCFUHPPColonyCellsAbstract

4、Thisstudywaspurposedtoinvestigatethecolonyformationofhighproliferativepotentialcolonyformingunits(CFUHPP)frombonemarrowderivedhematopoieticcellsofpsoriaticpatientsandp1genepromotormethylationinCFUHPPcells,andtoexploretherelationshipbetweenthecolonyformationandthemethylationst

5、atusofp1genepromoter.Bonemarrowderivedmononuclearcellsfrompsoriaticpatientsandnormalcontrolswereseparatedbydensitygradientcentrifugation,andwereculturedinmethycellulosesemisolidculturemediumwithSCF,GMCSF,ILandILfor1daystomeasurethecoloniesofCFUHPP.TheCFUHPPcolonycellswereco

6、llectedandmethylationstatusofp1genepromoterofCFUHPPcellDNAmodifiedwithsodiumbisulfitewasdetectedbythemethylationspecificpolymerasechainreaction(MSP).Theresultsshowedthatinmethycellulosesemisolidculturesystem,thenumberandthesizeofCFUHPPcoloniesofbonemarrow课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作

7、出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果ofpsoriaticpatientswereallsignificantlylessthanthatofnormalcontrols,thepositivefrequencyofp1genepromotermethylationinCFUHPPcellswaslowerthanthatinCFUHPPcolonycellsofnormalcontrol

8、s.Itisconcludedthatthecolonyforma

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