壳寡糖抗肿瘤作用及免疫调节机理的研究-_1

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果壳寡糖抗肿瘤作用及免疫调节机理的研究*作者：吴海明，华晓阳，何登全【摘要】目的研究壳寡糖对小鼠肿瘤生长和转移的抑制作用以及壳寡糖对培养的巨噬细胞相关的细胞因子表达的影响。方法接种肿瘤的小鼠尾静脉注射壳寡糖，观察壳寡糖对肿瘤的生长和抑制作用。用相对定量的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测壳寡糖对巨噬细胞相关细胞因子转录和翻译水平的影响。结果壳寡糖对S180肉瘤的抑瘤率为%，

2、对照组，两组比较，P＜。巨噬细胞加入壳寡糖作用24h后，细胞因子的表达明显增强(P＜)。结论壳寡糖具有良好抑制肿瘤生长和转移的作用。壳寡糖可增强巨噬细胞相关的细胞因子表达。【关键词】壳寡糖；肿瘤；巨噬细胞；细胞因子【Abstract】ObjectiveTostudytheinfluenceofoligochitosanininhibitinggrowthandmetastasisoftumorinrats，andinexpressionofcytokinesassociatedwithmacrophage.MethodsInhibitionof

3、growthoftumorwasobservedafteroligochitosaninjectedintoratsthroughtailvEin，theinfluencein课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果transcriptionandtranslationofcytokinesassociatedwithmacrophagewa

4、smeasuredbyRT-PCRandELISAtechniques.ResultsInhibitionrateofsarcomaS180was%，controlledafteroligochitosanaddedtomacrophage，expressionofcytokineincreasedsignificantly(P＜).ConclusionOligochitosancaninhibitgrowthandmetastasisoftumor，andenhanceexpressionofcytokinesassociatedwithma

5、crophage.【Keywords】oligochitosan；tumor；macrophage；cytokine甲壳素是自然界丰富的生物资源之一，其部分脱乙酰化产物壳聚糖，具有抗肿瘤、免疫调节、抑菌等多种生理功能。但壳聚糖不溶于水，利用纤维素酶将其降解为壳寡糖，具有较好的水溶性易被人体吸收，本实验旨在研究壳寡糖对实验性小鼠S180肿瘤和Lewis肺癌的抑制作用以及壳寡糖对体外培养的巨噬细胞相关的细胞因子基因表达的影响。1材料与方法材料课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估

6、计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果壳寡糖由浙大医学院分子生物学实验室制备。动物来源小鼠由浙江大学医学院动物中心提供，体重为18～20g。小鼠单核巨噬细胞由中科院上海细胞所提供。标准DNAmarker和ELISA实验试剂由上海贝西科技公司提供。1.方法壳寡糖抗肿瘤作用实验方法无菌取S180肉瘤和Lewis肺癌细胞，制成2×107细胞/ml的细胞悬液；皮下注射肿瘤液于ICR种小鼠，次日分组进行实验，每组10只ICR种小鼠。实验组尾静脉注射100m

7、g/kg的壳寡糖，对照组注射生理盐水，停药次日处死小鼠，剥离实体瘤称重或观察转移病灶数，计算抑瘤率。壳寡糖对巨噬细胞相关细胞因子表达的影响实验方法课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果培养小鼠采用RT-PCR法和ELISA法研究壳寡糖对巨噬细胞IL-1、TNF-a和IL-18的基因表达的影响：实验组和对照组巨噬细胞→分别提取RNA和收集上清

8、液→RT-PCR法检测mRNA水平基因表达的变化以及ELISA法检测蛋白表达量的变化。1.统计学方法各组值均采用均数±标准差表示，组间采用t检验，P＜