参龙煎剂对肺纤维化肺组织形态学影响的实验研究

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果参龙煎剂对肺纤维化肺组织形态学影响的实验研究【摘要】　　目的：观察参龙煎剂对博来霉素致大鼠肺纤维化的防治作用。方法：将大鼠按照性别、体重随机分为空白组、模型组、泼尼松组、参龙煎剂低剂量组、参龙煎剂中剂量组、参龙煎剂高剂量组。按照BLM5mg·kg－1体重复制大鼠肺纤维化模型。24小时后给药，观察各实验组7天、14天、28天肺组织病理形态表达情况的变化。结果：参龙煎剂治疗后模型大鼠肺部炎症浸润情况减轻、肺泡破损减轻、胶原沉积减

2、少。结论：结果表明，证实了参龙煎剂能够改善肺纤维化的异常组织结构，使延缓肺纤维化的病程成为了可能。【关键词】肺纤维化HE染色Masson染色肺纤维化是一组病因各异、表现相似的疾病谱，其病理主要表现为早期的炎症细胞浸润、肺组织损伤，晚期的细胞外基质及胶原沉积和肺组织结构的重塑[1]。许多研究表明，肺纤维化初期肺组织病理学改变以肺炎症浸润为主，大量的炎症细胞浸润，肺组织充血、肿胀，后期则以胶原纤维增生为主，大量胶原纤维代替正常组织，使肺组织破坏、功能丧失[2～3]。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等

3、要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果本实验旨在观察参龙煎剂即通过补肺益肾、祛瘀通络法对肺纤维化作用机制进行探讨。通过对各组大鼠的一般状态、病理形态的比较来说明参龙煎剂对博莱霉素引起的机体系统脏器损伤和一般功能状态的损害有一定的保护作用。　1资料实验动物健康Wistar大鼠216只：雌雄各半，体重180～210g，由沈阳医学院动物实验中心提供XX-0016），按清洁级标准饲养。实验药品盐酸平阳霉素：哈尔滨博莱制药有限公司生产，国药准字：H，批号，

4、8mg/支。参龙煎剂：辽宁中医药大学附属二院制剂室制备，主要成分由黄芪、沙参、当归、川芎、熟地、地龙、甘草等中药组成。醋酸泼尼松片：国药准字H，产品批号。5mg/片，天津天药药业股份有限公司。主要试剂及仪器万能显微镜BI-XX图像分析系统；HE染色、Masson染色试剂。　　2实验方法.1动物模型制备参照Szapiel[4]方法，将大鼠麻醉，暴露气管，一次性注入BLM注射液，左右旋转鼠板，使BLM注射液均匀分布于两肺，制成模型。.2实验动物分组及给药方法课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当

5、的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果实验动物按雌雄、体重分层随机分为6组，每组36只，每天灌胃一次，每周复查体重，调整给药量。共饲养4周，分别于7天、14天、28天3个时间点取材，每次处死12只动物。分组：正常对照组、模型组、泼尼松组、参龙煎剂低剂量组、参龙煎剂中剂量组、参龙煎剂高剂量组。正常组、模型组建模后第2日起每日予以1ml/kg生理盐水灌胃。其余各组按配好的药品以等容药品灌胃。.3标本的制备　　腹主动脉放血至死，剖开胸腔和颈部，分离气管和肺脏，

6、取下肺叶，用冰盐水洗去血渣，剔除结缔组织，滤纸吸干。称重后，同时结扎右主支气管，从肺门部离断，右肺上叶用定量输液泵小心灌入含有1/1000DFFC4%多聚甲醛溶液在25cmH20压力下进行灌注固定，切成××1cm3大小，30分钟后投入多聚甲醛溶液固定一周。取固定好的组织，在横颈最大处3mm后组织片，常规脱水，二甲苯透明，用自动石蜡包理机。切面4um的切片。备做HE、MASSON染色、光学显微镜下观察。.4病理形态学定量分析课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对

7、国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果用BI-XX图像分析系统对HE染色病理切片进行光密度测定。扫描时将切片分为3个区域：肺泡腔内无组织结构，OD值最低，定为无染区，其面积代表肺泡腔的面积；细胞核的OD值最高，定为深染区，其面积反映炎症细胞浸润程度；细胞外基质和炎症渗出染色较细胞核浅，HE切片中为粉色或浅粉，定为浅染区，与肺泡炎阶段炎性水肿和渗出的区域基本一致，在模型晚期其面积主要反映细胞外基质沉积程度。将切片置于图像扫描分析仪显微镜下，在放大200倍条件下，每张切片分别从四周和中间随

8、机选5个视野，测定深染区、浅染区和无染区所占的面积。.5利用HE染