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《针对隐孢子虫和贾第鞭毛虫双重实时荧光pcr检测方法的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、隐孢子虫和贾第鞭毛虫双重实时荧光PCR检测方法的建立廖立珊1,2，肖娜3，孙洁1,2，阮周曦1,2，林庆燕1,2，吕建强1,2，曹琛福1,2，曾少灵1,2，张彩虹1,2，陶虹1,2，刘建利1,2，唐金明1,2，杨俊兴1,2，花群义1,2，秦智锋1,2*(1.深圳出入境检验检疫局，广东，深圳市，518001；2.深圳市外来有害生物质检测技术研发重点实验室，广东深圳，518045；3.深圳市盐田区疾病预防控制中心，广东，深圳市，518001）摘要：本研究根据隐孢子虫和贾第鞭毛虫相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,通过对引物和探
2、针浓度、Taq酶以及反应条件等优化筛选后，建立了能同时检测隐孢子虫和贾第鞭毛虫的双重实时荧光PCR方法。所建立的隐孢子虫和贾第鞭毛虫双重荧光PCR检测方法的灵敏度为10-9，相当于46.1copies/µL，重复性良好，特异度实验未发现有非特异性扩增。结论本研究建立的双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地检测隐孢子虫和贾第鞭毛虫。 关键词：隐孢子虫，贾第鞭毛虫，双重实时荧光PCRDevelopmentofDuplexfluorescencequantitativePCRforCryptosporidiumandGiardiainwat
3、ersamplesLIAOLi-shan1,2,XIAONa3,SUNJie1,2,RUANZhou-xi1,2,LINQing-yan1,2,LVJian-qiang1,2,CAOChen-fu1,2,ZENGShao-ling1,2,ZHANGCai-hong1,2,TAOHong1,2,LIUJian-li1,2,TANGJin-ming1,2,YANGJun-xing1,2,HUAQun-yi1,2,QINZhi-feng1,2（1.ShenzhenEntry-ExitInspection&QuarantineBureau，Shen
4、zhen，Guangdong，518001,China；2．ShenzhenKeyLaboratoryofInspectionResearch&DevelopmentofAlienPestsShenzhen，Guangdong，518045,China；3.YantianDistrictofShenzhenCityCenterforDiseaseControlandPreventionShenzhen，Guangdong，518001,China)Abstract：AccordingtoconservativesequencesofCryp
5、tosporidiumandGiardialamblia,twosetsofprimersandTaq-manprobesweredesigned．Afteroptimizationofreactionconditions,wesetupadoublefluorescentreal-timePCRmethodtodetectCryptosporidiumandGiardialamblia.ThesensitivityofCryptosporidiumandGiardialambliadualfluorescencePCRdetectionm
6、ethodwas10-9,equivalentto46.1copies/ul,reproducibilitywasgood,andhighspecificity.Thedetectionsystembasedonreal-timePCRcouldbeutilizedtorapidlyandsensitivelydetectCryptosporidiumandGiardialamblia．Keywords：Cryptosporidiumparvum；Giardialamblia；DoublerealtimefluorescencePCR.隐孢
7、子虫(Cryptosporidiumparvum)是一种全球普遍存在的人兽共患寄生原虫，可引起隐孢子虫病。寄生于人体的种主要是微小隐孢子虫,该虫是机会致病原虫,但也是一种重要的腹泻病原。蓝氏贾第鞭毛虫(Giardialamblia)简称贾第鞭毛虫，是一种寄生于人类和动物肠道的原生动物。寄生于人体小肠、胆囊，主要在十二指肠，可引起腹痛、腹泻和吸收不良等症状，引起贾第虫病（Giardiasis），为人体肠道感染的常见寄生虫之一。近年来,由于不断发生水源性隐孢子虫病和贾第虫病的暴发流行,所以水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫卵囊的污染及其检测问题倍受关注。
8、最具有代表性的感染事件是1993年美国威斯康辛州公共饮水受隐孢子虫卵囊污染而发生大范围的人群急性腹泻[1]。美国疾病控制和预防中心(CDC)把它作为一种新的高传染性疾病来防治。澳
