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时间:2018-12-30
《革兰氏染色法实验报告(共5篇)》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划革兰氏染色法实验报告(共5篇) 革兰氏染色法的原理及其练习 摘要:革兰氏染色反应是细菌重要的鉴别特征,所以学习微生物学,进行革兰氏染色实验是很重要的。为保证染色结果的正确性,采用规范的的染色操作方法是十分必要。本实验主要对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌进行革兰氏染色,观察它们的染色特征,辨别是革兰氏阴性还是阳性,从而掌握其染色方法。染色方法与过程很清晰,但实验结果中金黄色葡萄球菌(Rosenbach)多组呈现假阴性。本实验的主要目的是熟悉并掌握
2、革兰氏染色方法及原理,但要想做出很好的染色得多加练习。本实验还可以锻炼显微镜操作技术和无菌操作技术。关键词:革兰氏染色大肠杆菌()金黄色葡萄球菌(S.aureusRosenbach)枯草杆菌() 引言目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 革兰氏染色是微生物学中最重要的鉴别染色方法,它可以直接将细菌分为革兰氏阴性和革兰氏阳性。革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性和
3、革兰氏阴性两种类型,这是由这两种细菌细胞壁结构组成与结构的差异所决定的。经过一定的染色过程后,革兰氏阳性的细菌会因为细胞壁肽聚糖的含量高,脂质含量低而保持第一次染色的蓝紫色。革兰氏阴性细菌细胞壁的脂质含量高,乙醇处理时脂质溶解,蓝色被洗脱,复染后变为红色。革兰氏染色原理很简单,染色时需注意要注意使用处在活跃生长期的细菌,涂片不宜过厚,严格控制脱色时间。 大肠杆菌()是革兰氏阴性细菌,金黄色葡萄球菌(S.aureusRosenbach)与枯草杆菌()都是革兰氏阳性细菌,染色后在显微镜下容易区别。同时它们的形态各异,可以根据具体颜色和形态差异来判断染色是否成功。
4、 本实验还涉及到高倍油镜的使用。使用油镜与用一般的镜头不同,具体使用在实验方法中描述。 材料 菌种 大肠杆菌16小时牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物,金黄色葡萄球菌16小时牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物,枯草杆菌16小时牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。 溶液与试剂 无菌生理盐水,草酸铵结晶紫染液,卢戈氏碘液,95%乙醇,番红复染夜,香柏油,二甲苯 仪器 酒精灯,载玻片,显微镜,双层瓶,接种环,滴管等 方法 制片:取活跃生长期菌种按常规方法涂片、干燥和固定。 染色目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平
5、,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 初染:滴加草酸结晶紫染液覆盖涂菌部位,染色2min,水洗至流出水无色。 媒染:用卢戈氏染液冲去残留水迹,再用碘液覆盖1min,倾去碘液,水洗至流出水无色。 脱色:将玻片上的水用吸水纸吸取,用滴管流加95%乙醇脱色,稍后立即洗去乙醇。 复染:将玻片上的水用吸水纸吸去,用番红复染液染色2min,水洗,吸去残水烤干。 镜检 分别用香柏油覆盖涂菌部位,先用低倍镜找到菌,换用 色情况。观察结束后,用二甲苯擦洗镜头。的
6、物镜观察染 2.实验结果与分析 结果分析 大肠杆菌竟革兰氏染色后呈现红色,3个图片上都是红色,因此大肠杆菌应该是革兰氏阴性细菌,与事实相符,染色成功。 金黄色葡萄球菌比较难染色,从结果中可以分析,前两个涂片的菌种可能培养目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 的时间太长了。因为老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性,老龄的G+细菌细胞壁老化,不能在乙
7、醇处理的时候使肽聚糖网孔收缩而使碘-结晶紫复合物滞留在细胞壁,从而在复染时被染红。 枯草杆菌染色结果很好,蓝紫色很明显,染色成功。 小结 1、获得本实验成功的关键:固定时烘烤要适度,太轻会在冲洗时冲走细菌,过度会破坏细菌形态;脱色的时间要严格控制,脱色不够造成假阳性,脱色过度会出现假阴性;选用新培养的菌种,涂片时不能太厚。这些问题在实验过程中几乎都有出现,尤其是对于初学者,特别需要注意。 2、革兰氏染色可以迅速将细菌分为阴性和阳性,是很重要的染色方法,也是相当复杂的染色方法。通过练习革兰氏染色,既掌握了一般的染色方法,又为以后技术要求更高的染色,观察,鉴
8、别奠定了基础。 实验一
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