葡萄糖氧化酶的活力测定实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划葡萄糖氧化酶的活力测定实验报告  葡萄糖氧化酶酶活测定  1酶活单位与定义  、30℃的条件下,每分钟能把μmol的β-D-葡萄糖氧化成D-葡萄糖酸和H2O2的酶量为一个单位。  2测定原理  葡萄糖和氧反应,在葡萄糖氧化酶的作用下,生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢和无色的还原型邻联茴香胺在过氧化物酶的作用下,生成水和红色的氧化型邻联茴香胺。3试剂和溶液  磷酸盐缓冲液  称取  磷酸二氢钠和  磷酸氢

2、二钠,溶于无CO2的水中,稀释到1000ml。  邻联茴香胺甲醇缓冲液  1g邻联茴香胺加在100ml甲醇中搅拌溶解备用。临用时现配,取加入到上述缓冲液12ml中混匀。  180g/l葡萄糖水溶液  18g葡萄糖加适量水溶解,并定容至100ml。  %辣根过氧化物酶液  称取辣根过氧化物酶10mg,溶于30ml蒸馏水。  4仪器设备目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利

3、开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划葡萄糖氧化酶的活力测定实验报告  葡萄糖氧化酶酶活测定  1酶活单位与定义  、30℃的条件下,每分钟能把μmol的β-D-葡萄糖氧化成D-葡萄糖酸和H2O2的酶量为一个单位。  2测定原理  葡萄糖和氧反应,在葡萄糖氧化酶的作用下,生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢和无色的还原型邻联茴香胺在过氧化物酶的作用下,生成水和红色的氧化型邻联茴香胺。3试剂和溶液  磷酸盐缓冲液  称取  磷酸二氢钠和  磷酸氢二钠,溶于无CO2的水中,稀释到1000ml。  邻联茴香

4、胺甲醇缓冲液  1g邻联茴香胺加在100ml甲醇中搅拌溶解备用。临用时现配,取加入到上述缓冲液12ml中混匀。  180g/l葡萄糖水溶液  18g葡萄糖加适量水溶解,并定容至100ml。  %辣根过氧化物酶液  称取辣根过氧化物酶10mg,溶于30ml蒸馏水。  4仪器设备目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划  

5、721-分光光度计、恒温水浴、秒表  5分析步骤  待测酶样品的处理将待测酶样做适当稀释后进行试验,使得测定△A值在~。  测定  6结果表示与计算  X=[△A÷]×n  t—测定时间,min  —样品体积,ml  —消光系数  n—稀释倍数  所得结果表示至整数。  葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖  【原理】  葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase,POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受

6、体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。  【试剂】目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划  1./L磷酸盐缓冲液()称取无水磷酸氢二钠及无水磷酸二氢钾溶于蒸馏水800ml中,用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调pH至,用蒸馏水定容至1

7、L。  2.酶试剂称取过氧化物酶1200U,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg,溶于磷酸盐缓冲液80ml中,用1mol/LNaOH调pH至,用磷酸盐缓冲液定容至100ml,置4℃保存,可稳定3个月。3.酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中,用棕色瓶贮存。4.酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合,4℃可以存放1个月。  5.12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸于蒸馏水约800ml中,加温助溶,冷却后加蒸馏水定容至lL。  6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒

8、重的无水葡萄糖,溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中,以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。  7.5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液放于100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。  【操作步骤】  1.自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。  2.手工操作法取试管3支,按下表操作。  读取标准管及测

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