薄层层析法,华东理工实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划薄层层析法,华东理工实验报告　　生物化学实验报告　　姓名：XXX　　学号：XXXXXX　　专业年级：临床八年制__　　组别：第二实验室　　实验报告　　一、实验目的　　掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。　　二、实验原理　　有机混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力弱的组分则滞后，由于各组分不同的移动速度而使得她们

2、得以分离。物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值Rf表示。　　Rf?　　原点至层析斑点中心的距离原点至溶剂前沿的距离　　三、实验仪器与药品　　×硅胶层析板两块，卧式层析槽一个，点样用毛细管。　　四、物理常数　　五、仪器装置图目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　“浸有层析板的层析槽”图　　1-层析缸，2-薄层板，3-展开剂饱和蒸汽，4

3、-层析液六、实验步骤　　薄层板的制备：　　称取2～5g层析用硅胶，加适量水调成糊状，等石膏开始固化时，再加少许水，调成匀浆，平均摊在两块×15cm的层析玻璃板上，再轻敲使其涂布均匀。固化后，经105℃烘烤活化，贮于干燥器内备用。点样。　　在层析板下端处，取毛细管，分别蘸取偶氮苯、偶氮苯与苏丹红混合液，点于原点上　　定位及定性分析　　用铅笔将各斑点框出，并找出斑点中心，用小尺量出各斑点到原点的距离和溶剂前沿到起始线的距离，然后计算各样品的比移值并定性确定混合物中各物质名称。　　实验注意事项　　1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干

4、时要放在平整的地方。　　2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端－1cm时要及时将板取

5、出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。讨论：　　七、思考题　　生物化学实验报告　　姓名：XXXXX　　学号：XXXXXXXXXXXXXX　　专业年级：XXXXXXXXXXXXXXX　　组别：第X实验室　　生物化学与分子生物学实验教学中心　　实验名称　　实验日期XXXX-XX-XX　　合作者　　评分XXXX氨基酸的薄层层析实验地点指导老师第X实验室XXX教师签名批改日期　　一、实验目的　　1、掌握薄层层析法的实验原理。　　2、掌握氨基酸薄层层析法的基本操作方法。　　3、掌握如何根据移动速率来鉴定被分离的物质的方法。　　二、实验原理目的-通过

6、该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　1、薄层层析法是色谱分析技术的一种。是将吸附剂、载体或其他活性物质均匀涂铺在平面板上，形成薄层后，在此薄层上进行层析分离的分析方法。一般是将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样，不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样品

7、随着展开剂的移动速率也不同，因而可以彼此分开。硅胶吸附薄层层析：　　吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶。硅胶：表达式为SiO2·XH2O。层析用硅胶是一种多孔性物质，它的硅氧环交链结构表面上密布极性硅醇基，这种极性的硅醇基能和许多化合物形成氢键而产生吸附.　　硅胶吸附薄层层析的特点：　　②硅胶的吸附能力比氧化铝稍弱，其吸附活性也与含水量呈负性相关。　　②硅醇基显较弱的酸性，因此，硅胶只能用于中性、或酸性成分的分离，碱性成分不能用它分离。　　③硅胶的活化温度通常为105℃－110℃，不能过高。　　2、氨基酸与茚三酮的显色反应：　　茚三

8、酮水化后生成水化茚三酮，它与氨基酸的羧基反应生成还原茚三酮、氨及醛，与此同时，还原茚三酮又与氨及茚三酮缩合生成紫红化合物而使氨基酸斑点显色。　　3、混合氨基酸被分离后在薄层层析图谱上的位置用相对迁移率—Rf值　　来表示。