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时间:2018-12-29
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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划细胞结构综合性实验报告(共9篇) 植物原生质体的分离、纯化及融合 引言原生质体是除去细胞壁的裸露细胞。在适宜的培养条件下,分离的原生质体能合成新壁,进行细胞分裂,并再生成完整植株。 分离原生质体采用酶解法。其原理是根据由纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶配制而成的溶液对细胞壁成分的降解作用,而使原生质体释放出来。原生质体的产率和活力与材料来源、生理状态、酶液的组分,以及原生质体收集方法有关。酶液通常需
2、要保持较高的渗透压,以使原生质体在分离前细胞处于质壁分离状态,分离之后不致膨胀破裂。渗透剂常用甘露醇,山梨醇,葡萄糖或蔗糖。酶液中还应含一定量的钙离子,来稳定原生质膜。游离出来的原生质体可用过筛一低速离心法收集,用蔗糖漂浮法纯既,然后进行培养。 不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具
3、有巨大的潜力。在植物遗传操作研究中也是关键技术之一。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划细胞结构综合性实验报告(共9篇) 植物原生质体的分离、纯化及融合 引言原生质体是除去细胞壁的裸露细胞。在适宜的培养条件下,分离的原生质体能合成新壁,进行细胞分裂,并再生成完整植株。 分离原生质体采用酶解法。其原理是根据由
4、纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶配制而成的溶液对细胞壁成分的降解作用,而使原生质体释放出来。原生质体的产率和活力与材料来源、生理状态、酶液的组分,以及原生质体收集方法有关。酶液通常需要保持较高的渗透压,以使原生质体在分离前细胞处于质壁分离状态,分离之后不致膨胀破裂。渗透剂常用甘露醇,山梨醇,葡萄糖或蔗糖。酶液中还应含一定量的钙离子,来稳定原生质膜。游离出来的原生质体可用过筛一低速离心法收集,用蔗糖漂浮法纯既,然后进行培养。 不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,
5、分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究中也是关键技术之一。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 人工诱导原生质体融合可使用物理学方法,如运用
6、细胞融合仪,在电场诱因导下实现融合,然而至今广为使用的仍是聚乙二醇溶液引起原生质体的聚集和粘连,然后用高pH钙溶液相处理的化学方法。该法应用分子量至为1500~6000的聚乙二醇溶液引起原生质体的聚集和粘连,然后用高pH的钙溶液稀释时,就产生了高频率的融合,融合的频率和省略常与所有PEG的分子量、浓度,作用时间,原生质体的生理状态与密度以及操作者的细心程度有关。 1材料、试剂与方法 材料 菠菜叶片,唐古特白刺愈伤组织,金盏菊花瓣。 试剂 1.70%酒精。 2.%升汞水溶液,并滴入少许TWeen80。
7、 3.灭菌蒸馏水。 4./L和/LCaCl2·2H2O溶液,并加有%MES,~。 5.20%和12%蔗糖溶液,pH~。 6.酶液A 纤维素酶(cellulase,OnozukaR-102% 果胶酶(13ectinase,Serva)1% (若用国产EA3-867纤维索酶,则果胶酶可省去。) 甘露醇mol/L目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特
8、制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 CaCl2·2H2Omol/L MES% pH5.8~6.2 7.酶液B 纤维素酶(OnozukaR-10)2% 离析酶(MacerozymeR-10)1% 半纤维素酶(hemicellulase,Sigma)% 甘露醇mol/L CaCl2·% MES 8.PEG溶液 9.高pH,高钙稀释液~ 方法 菠菜叶片
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