抗原与免疫血清的制备(实验报告)

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划抗原与免疫血清的制备(实验报告)　　免疫实验—抗血清制备及抗体效价检测　　摘要：用具有抗原性的物质牛血清白蛋白对其进行抗体效价检测。　　关键字：牛血清白蛋白，每次不超过2mL；小鼠为10～100μg/次，每次不超过。　　小鼠腹腔注射　　以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推～，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。　　兔子可以分别尝试皮下、皮内、耳静脉、肌肉注射　　实验二：

2、抽血、放血，分离抗血清　　一、采血　　小鼠采血　　、尾部采血：需血量少时可用此方法。将小鼠放在在有开孔的离心管内，显露尾部，将尾端剪去约5mm，从尾根部向尾端部按摩，血即从断端流出。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　、小鼠睚眦采血：将毛细管折断，使其断口锋利。采血时，左手拇指和食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并用中指配合，轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提

3、示眼眶后静脉丛充血。用毛细管的断口，右手拇指、食指和中指握住毛细管，将其尖端插入内眼角与眼球之间，轻轻向眼底方向刺入约2~3mm，手指旋转捻动毛细管以刺破静脉丛，鼠血顺毛细管流入无菌离心管中，收集鼠血。采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。用本法短期内可重复采血。小鼠一次可采血—ml，大鼠一次可采—。　　家兔的采血　　、耳静脉抽血：将家兔置于兔固定箱内，对家兔进行耳静脉抽血，此法用于小量抽血，验血测抗体效价，以便决定加强免疫或放血，　　与耳静脉注射方式相　　反。　　、心脏抽血：家兔固定---准确找到心脏部位---剪毛---消毒---进针抽血，抽至50ml，从硅胶管接头处

4、取下注射器，拔针头，将血液注入100ml无菌空三角瓶，再重复上述操作继续抽血，直至抽完。　　、颈动脉放血：家兔固定---剪毛---找颈动脉管）---小心分开动脉上的肌肉、神经等---开口---放血，接入100ml无菌空三角瓶。　　注意：看到气管，停用所有锐器，可用止血钳、钝玻棒。注意不要剪破毛细动脉管！！！　　二、抗血清的分离，保存目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　1、斜置

5、装血液的三角瓶；　　2、用无菌玻棒剥落、松动瓶壁上的血块；　　3、原样包扎好，做好记号，放进冰箱过夜；　　4、次日：估计分离的血清量并观察描述血清颜色；去血块，离心取上清，加叠氮钠，混匀，分装小管，作好标记，-20或-80℃保存待测。　　实验三：酶免疫吸附试验法测定抗体效价　　一、ELISA原理　　酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmunosorbentassay，简称ELISA)是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。ELISA过程包括抗原(抗体)包被在固相载体上，加待测抗体(抗原),再加相应酶标记抗体(抗原)，生成抗原(抗体)--待测抗体(抗原

6、)--酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体(抗原)的量。　　二、实验仪器、材料、试剂　　仪器：酶标板，酶标仪、保鲜膜、排枪　　材料：牛血清白蛋白　　试剂：包被缓冲液：MpH碳酸盐缓冲液　　PBS溶液　　PBST洗涤液：含%Tween20的M的PBS　　底物溶液：TMB目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　2MH2SO4　　三、实验方

7、法和步骤　　1.加抗原：取酶标板，加入100μl/孔的抗原溶液　　2.包被抗原：保鲜膜包好，37℃1h或4℃过夜　　3.封闭：甩干后以PBST洗涤3次，3min/次，每孔加入100μl5%。保鲜膜包好，37℃，2h后，取出包被、封闭好抗原的酶标板,甩干孔内液体。以PBST洗涤3次，3min/次　　4.加待测血清：标记各孔，加入相应稀释度的抗体100μl/孔。37℃，保鲜膜包好，60min后甩干孔内液体　　免疫学实验报告　　姓名:买迪来木.坎代尔学号:XXXX1222班级:XX131　　实验一