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时间:2018-12-28
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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划溶血试验的实验报告 酸溶血试验 1.酸溶血试验的原理:阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者体内存在对补体敏感的红细胞。酸化血清溶血试验,也称Hamtest,即红细胞在酸性的正常血清中孵育,补体被激活,PNH红细胞破坏而产生溶血。而正常红细胞不被溶解,无溶血现象。 2.适应症:本试验阳性主要见于PNH,某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时也可阳性。 3.试验仪器:水温箱,离心机 ①试验试剂:同型正常人血清或AB型血清:取正常人同型或AB型血5ml分离血清备
2、用。取新鲜血清放60℃水浴3分钟灭活备用。②50%RBC悬液:由被检者静脉采血2ml,肝素抗凝。用生理盐水洗涤红细胞2次,配成50%红细胞悬液。 ③/lHCL 4.操作步骤: ①取患者的红细胞,用生理盐水重复洗涤2次,最后配成50%红细胞悬液; ②取与患者同型或AB型血3-5ml,待其自然凝固,分离正常人血清目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 ③取同一正
3、常人的红细胞,用生理盐水重复洗涤2次,最后配成50%红细胞悬液;按下表操作: 试管号同型或AB型血清 0灭活血清0 0 0 患者50%红细胞悬液000正常人50%红细胞悬液000 置37℃水浴中1小时,观察结果。 参考值范围及报告; 1.试验管溶血、对照管不溶血为阳性。 2.试验管和对照管都不溶血为阴性。 注意事项: 1.血清酸化后,试管必须塞紧,否则二氧化碳逸出,可使血清酸度下降。 2.抗凝剂会影响PH值,故不宜用抗凝血浆,但可用脱纤维血; 3.为了保证补体充足,最好用混合血清,但正常对照红细胞必须用“O”型血; 4.如患者曾经多次输
4、血,血中异常红细胞相对减少,本试验可为弱阳性或阴性。 溶血性实验 分光光度法测定 1、原理根据红细胞破裂释放出来的血红素在可见光波长段具有最大吸收的原理,采用分光光度法测定受试物的溶血程度。2、实验方法目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 取新鲜血液8mL,肝素抗凝,加入%生理盐水稀释。向1mL纳米粒溶液()中加入100μL稀释血液,于37℃摇床中温浴一定时
5、间后,750g离心5min以去除完整的红细胞及红细胞碎片。将离心得到的上清液加入到2mL乙醇/盐酸混合溶液(39:1;99%乙醇(v/v):37%盐酸(w/v))中沉淀除血红蛋白外溶液中的所有组份,再以750g离心5min,取上清于紫外分光光度计398nm处测吸光度值。其中阳性对照(positivecontrol,pc)为蒸馏水,阴性对照(negativecontrol,nc)为%生理盐水,均用同样方法处理得纳米粒溶液的溶血率(Hemolysisrate,HR%) 组别新鲜血液mL蒸馏水%生理盐水材料 3结果观察:①最大吸收波长的确定:取阳性管的上清液在紫外可
6、见分光光度计上扫描,测得最大吸收波长。②溶血率的测定:将各管的溶液置入干燥离心管中离心,取上清在分光光度计上,在最大吸收波长处,以阴性管为空白读取各管A值。4结果判断:用下式计算各试验管的溶血率%: 溶血率(%)=(A试-A阴)/(A阳-A阴)×100% 式中:A试为试验管吸光度;A阴为阴性对照管吸光度;A阳为阳性对照管吸光度。一般溶血率溶血试验的实验报告)白质疏水部位相互作用,不会引起蛋白质变性,从而是红细胞内物质渗出,发生溶血现象。而氯仿根本无法溶解红细胞。六、讨论目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业
7、水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 1.试分析水进入红细胞膜的速度是由于扩散吗?如果不是,如何证明?答:不是。因为水进入红细胞的速度很快,而渗透作用不能这么快。红细胞膜上存在水通道,控制水的进出。 证明方法:可以用同位素标记的方法,将水通道蛋白标记,如果发现其中有水通过,说明水不是仅仅通过渗透作用进入细胞的。 2.为什么溶液中微量的去垢剂可对活细胞产生严重的影响? 答:因为去垢剂是一些具有亲水的极性基团和疏水的非极性基团的长链分子。非离子型去垢剂
8、如Trit
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