质粒的分子生物学与质粒载体

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1、第三章质粒的分子生物学与质粒载体一、填空题1．基因工程中有3种主要类型的载体：——-------、------------一、-----------.2.由于不同构型的DNA插入EB的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同，SCDNA的泳动速度—----------—，OCDNA泳动速度—---------—，LDNA居中，通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。3.质粒的复制像染色体的复制一样，是从特定的起始点区开始的。然而，质粒的复制可以是—---—向的、或是—----—向的。在杂种质粒中，每个复制子的起点都可以有效

2、地加以使用。但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。并认为：当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后，在正常情况下—------—的复制起点可能被苯闭。4.就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：—-----—、—---------—、—----------------—。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。5.如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则属于—---------—群，这是因为它们的——————————所致。6.质粒拷贝数是指细胞中—----------------------

3、--—。7.复制子由三部分组成：(1)—-----------------—---(2)——-----------————(3)—--------------—。8.酵母的2μm质粒有------------，可以配对形成哑铃结构。9.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫----------------。10.pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于----——，它的四环素抗性基因来自于—-----------—，它的氨苄青霉素抗性基因来自于—---------—。11.质粒的消失同染

4、色体基因的突变是不同的，前者不能恢复，后者可以通过—------—恢复该基因的性状。12.ColEl质粒复制的起始需要三种酶，即—-----------—、一------------和一------。13．YAC的最大容载能力是—-----------—，BAC载体的最大容载能力是—---------—。14．pSCl01是一种---------——复制的质粒。15．把那些没有可检测表型的质粒称为—--------------—。16．转座子主要由下列部分组成：(1)—-----————————(2)---------------——(3)—-

5、---------------—。17．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过——---------和——两种质粒改造而来。它的复制子来自—----------—，Amp抗性基因则是来自—--------—。18．在基因型的表示中，符号Ω表示—-----------—；符号△表示—--------------—。二、判断题1．迄今发现的质粒DNA都是环状的。2．线性质粒同环状质粒一样都不带有宿主必需的基因。3．有a、b、c三个质粒，因为a和b能够共存于一个细胞，a和c也可共存于同一个细胞，所以b和c一定能够共存于同一个细

6、胞。4．插入元件(1S)也是一种转座元件，它除了有转座酶基因外，还有附加基因。5．如果两个不同的质粒可以稳定地共存于同一个细胞中，这两种质粒则属于同一个不亲和群。6．一个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。7．能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。8．任何一种质粒都可以用氯霉素扩增的方法，增加它的拷贝数。9．只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复制。10．CsCl-EB密度梯度离心法纯化SCDNA原理是根据EB可以较多地插入到SCDNA中，因而沉降速度较快。11．质粒ColE

7、l同pSCl01共整合后，得到重组质粒pSCl34，具有两个复制起点，这两个起点在任何细胞中都是可以使用的。12．pBR322可以用于黏性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接，无论用哪种方法连接，都可以用同一种酶回收外源片段。13．所谓穿梭质粒载体是能够在两种以上的不同宿主细胞中复制的质粒，所用的复制起点不同。14．一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。15．ColEl是惟一用作基因工程的自然质粒载体，它具有四环素抗性标记，因而很容易选择。16．某一染色体DNA经内切酶SalI切割后，产生了若干个具有黏性末端的DNA片段，将这

8、些片段分别在T4DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导人受体细胞，都可以进行独立地复制。17．如果细菌的某种表型特征在UV处理下丧失后不再恢复，这种