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时间:2018-12-25
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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划冰冻报告,细胞幼稚 细胞生物学实验报告 细胞冻存 姓名: 学号: 班级: 专业: 同组成员: 一、实验原理 在低于-70℃的超低温条件下,由机体内部的生化反应极其缓慢,甚至终止,因此采用适当的方法将生物材料降至超低温条件,即可使生命活动固定在某一阶段而不衰老死亡。当以适当的方法将冻存的生物体恢复至常温时,其内部的生化反应可恢复正常。 冷冻保存就是将体外培养物悬浮在加有或不加冷冻保存液的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度,并在此温度下对其进行长期保存的过
2、程。水在低于零度的条件下→结冰→细胞死亡。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 目前常用的保护剂为二甲亚砜和甘油,它们对细胞无毒性,分子量小,溶解度大,易穿透细胞。最适冷冻速度:不同细胞的最适冷冻速度不同。标准冷冻的开始速度为-1至-2℃/min,当温度低
3、于-25℃时,可加速,到-80℃时可直接加入液氮中。复苏细胞时则直接将细胞的冻存管放到40℃热水中迅速解冻。 二、实验目的 1、掌握无菌操作技术。 2、.掌握细胞冻存的一般方法与步骤。 3、掌握培养细胞的消化方法。 4、了解在倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态和生长状况。 三、实验仪器、材料、试剂及用品 1、仪器:超净工作台、CO2培养箱、倒置相差显微镜 2、材料:人宫颈癌HeLa细胞 3、试剂:胰酶、DMEM培养基、血清、DMSO、抗生素 4、用品:培养瓶,试管,移液管,巴斯德吸管,废液缸,75%酒精棉球,酒精灯 四、实验步骤 1、穿好实验服,进入无菌室前穿鞋套
4、、洗手。 2、倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置370C下预热。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 3、无菌室及超净台紫外线照射,关闭超净台紫外灯,打开可见光灯开关,打开抽风机,用 75%酒精擦双手消毒,再用酒精棉擦拭桌面。 4、点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。 5、配置
5、5ml冻存液,即DMEM,FCS,。 6、取待冻存的细胞用胰酶消化,靠近火焰倒胰酶,显微镜下观察细胞的消化状态,待细胞大部分收缩、突起、一半变圆,细胞边界清晰时,即可立起或翻转培养瓶停止消化。 7、加两滴管2mL冻存液,即全面吹打细胞瓶壁,吹打均匀,细胞浓度宜大,3×106个/mL左右。 8、细胞悬液装入冻存管中。用胶布封裹,做好标记。冻存管在40℃下存放30分钟,转放-20℃~2小时,再转入-700℃,4~12小时后即可转移到液氮内,注意进行登记。 五、实验结果 实验结果见下节课细胞复苏后可观察到。 西南大学《细胞生物学自主实验》 课程论文 论文题目:人体外周血淋巴细胞
6、培养与染色体核型分析 学院:生命科学学学院 专业:生物科学 班级:XX级3班 姓名:张萌目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 学号: 22XX 人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析 【摘要】本文主要介绍通过对人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析,初步了解到对人体外周淋巴细胞培养方法与人类体细胞染色体核型分析的方法。采用人工离体培养的方法,采集人体外周血淋巴细胞,在加有植
7、物血球凝集素的培养基中培养,经过恒温培养,秋水仙素处理、低渗和固定,获得大量有丝分裂中期细胞,最后经空气干燥法制片,对人体外周淋巴细胞进行染色体核型分析。 【关键词】人体外周血淋巴细胞染色体核型分析细胞培养1综述 细胞培养是在体外模拟体内的生理环境培养从机体中取出的细胞并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。要使细胞能在体外长期生长必须满足两个基本要求:一是供给细胞存活所必需的条件,如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有
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