几丁质对南方根结线虫的生物防治研究

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1、青岛农业大学毕业论文（设计）题目：刀孢蜡蚧菌LecanicilliumpsalloitaeCFCC84958产生的几丁质酶对南方根结线虫卵的破坏作用姓名：XXXXX学院：农学与植物保护学院专业：植物保护班级：XXXX学号：XXXXX2011年5月20日目录中文摘要1Abstract2引言31材料与方法61.1供试菌株61.2供试试剂61.3产几丁质酶培养条件61.4几丁质酶活性测定61.4.1几丁质降解酶系活性测定61.4.2N-乙酰葡萄糖胺（NAG）标准曲线71.4.3几丁质外切酶活性测定71.4.4对硝基苯酚（pNP）标准曲线71.5刀孢蜡蚧菌

2、产生的几丁质酶对根结线虫卵的破坏81.5.1根结线虫卵悬液的制备81.5.2卵孵化抑制率及破坏率的测定82结果与分析92.1几丁质降解酶系活性测定的结果92.2几丁质外切酶活性测定的结果92.3刀孢蜡蚧菌培养滤液对卵孵化的影响102.4南方根结线虫卵壳的形态变化112.5结论123讨论与展望133.1讨论133.2展望133.2.1安全性评价133.2.2根结线虫生物防治展望13致谢15参考文献16刀孢蜡蚧菌LecanicilliumpsalloitaeCFCC84958产生的几丁质酶对南方根结线虫卵的破坏作用植物保护专业XXXX指导教师XXX摘要

3、：根结线虫卵壳主要是由几丁质和蛋白质构成。根结线虫卵寄生或产毒真菌产生几丁质酶活性是评价食线虫菌物生物防治潜力的重要生化指标之一。本研究分别采用根结线虫卵寄生真菌刀孢蜡蚧菌，测定其产生的几丁质降解酶活性，该菌的培养滤液从第2d具有几丁质降解酶系活性，第4-6d就达到酶活性高峰值3.98μmol/hmL；从第2d开始就产生几丁质外切酶，第4d酶活性为0.26umol/hmL。表明刀孢蜡蚧菌CFCC84958菌株具有较高产生几丁质酶的活性。该菌4d的培养滤液对根结线虫卵孵化和破坏作用随浓度的增加而增强，7d后孵化抑制率和破坏率分别为94.52%和84.

4、32%。显微观察线虫卵壳变形和破坏情况的结果表明，刀孢蜡蚧菌CFCC84958产生的几丁质酶可以引致根结线虫卵壳的裂解，抑制根结线虫卵的孵化。关键词：根结线虫卵；刀孢蜡蚧菌；几丁质酶；卵破坏；卵孵化17TheDestructiveEffectofChitinaseActivitiesproducedbyLecanicilliumpsalloitaeCFCC84958onMeloidogyneincognitaeggsStudentmajoringinPlantProtectionXXXXTutorXXXAbstract:Theeggshellsof

5、Meloidogynespp.aremainlycomposedofchitinandprotein.ThechitinaseactivityoffungiwhichparasitizeeggsorproducetoxinsforMeloidogynespp.isoneofthemostimportantbiochemicalcharacters.Itisusedforevaluatingthebiocontrolpotentialofnematophagousfungi.TheendochitinaseandexodchitinaseofLeca

6、nicilliumpsalloitaeCFCC84958weretestedwithNAGandpNP.Themaximumactivityofendochitinasewas3.98μmol/hmlduring4d-6dandtheactivityofexodchitinasewas0.26μmol/hmlatthe4d.TheresultsshowedthatL.psalloitaeCFCC84958hadhighchitinaseactivity.After7daysofincubationwiththechitinaseproducedby

7、L.psalloitaeCFCC84958,ratesofhatchinginhibitoryanddestructionofeggsachieved94.52%and84.32%,respectively.MicroscopicobservationsdemonstratedthattheeggshellofMeloidogynespp.wasdeformedanddestroyed.ThereseachindicatedthatchitinaseproducedbyL.psalloitaeCFCC84958causedthelysisofMel

8、oidogynespp.eggshellsandresultedintheinhibitionofegghatchingi