黄曲霉毒素分析方法(1)

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1、泰乐祺科技－黄曲霉毒素分析方法汇总一、多功能净化柱＋KRC光化学柱后衍生法1、简介多功能净化柱是由多种固相复合填料不仅包括大分子物质，更重要的是含有多种活性亲脂性（非极性）和带电（极性）物质，用来吸附各种酯类，叶黄素，化学物质，碳水化合物和蛋白质等干扰物。多功能净化柱＋KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast226/260多功能净化柱可以将黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2很好的分离出来，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量。2、多功能净化柱特点：多功

2、能净化柱可以简化样品提取、净化步骤，无需清洗和洗提。可以实现多种毒素检测，有效降低检测成本；l  HPLC＋FLD+KRC衍生化，可以有效提高检测灵敏度，实现较低的检测限(黄曲霉毒素B10.05ppb)。l  光化学衍生操作简便，无需使用衍生试剂（通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂，分析成本高，操作麻烦，仪器故障率较高）l  一步法净化，回收率高达90％左右。广泛适用于各类农产品：谷物、淀粉、动物饲料、食品、坚果、棉籽等。3、多功能净化柱/KRC衍生法操作步骤简介：1、提取样品：研磨粉碎、称重25g样品；用乙腈/水（84/

3、16V/V）混合样品，高速均质1分钟。   2、过滤：将提取的样品定量滤纸过滤，收集滤液；3、取4－6ml滤液快速通过多功能净化柱PribofastM226或PribofastM2604、收集过柱溶液，直接用于HPLC检测，KRC衍生化后直接记录黄曲霉毒素浓度二、免疫亲和柱＋KRC光化学柱后衍生法1.简介Pribofast黄曲霉毒素总量免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的毒素，从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2浓度，提高检测的准确性和灵

4、敏度。2.免疫亲和柱/KRC衍生法特点：特异性很强使得样品净化效果极佳；使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速，提高检测效率高l  HPLC＋FLD+KRC柱后衍生化，有效提高检测灵敏度，实现较低的检测限(黄曲霉毒素B10.05ppb)。l  衍生化操作方便，光化学衍生化无需使用衍生试剂（通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂，分析成本高，操作麻烦，仪器故障率较高）l  回收率高，达到90％以上3.免疫亲和柱法操作步骤简介：1、提取样品：研磨、称重50g样品；用甲醇/水（80/20V/V）混合物将样品高速混匀1分钟。   2、

5、过滤：将提取的样品滤膜过玻璃纤维滤纸，   3、将回温的免疫亲和柱安装在泵流操作架进行过柱净化：经过Pribofast黄曲霉毒素总量免疫亲和柱（IAC-010-3）活化、淋洗、洗脱三步骤，洗脱下来的溶液可直接用于HPLC检测；1、测定：HPLC直接进样，经色谱柱KRC光化学柱后衍生化后直接记录黄曲霉毒素浓度；三、PribofastKRC柱后衍生器和HPLC参数PribofastKRC柱后光化学衍生器波长：254nm   HPLC-色谱柱：黄曲霉毒素专用色谱柱150x4.6mm;C-18   流动相:甲醇/水 (45/55v/

6、v)   流量：1.0mL/min   柱温：30°C   进样体积：20μL   荧光检测器：λ-激发波长：365nm   λ-发射波长：440nm四、酶联免疫法检测黄曲霉毒素总量采取直接竞争ELISA方法，利用酶标仪测定样品和标准品的样本的吸光值计算得到样品中黄曲霉毒素总量的含量。试剂盒检测时间：15分钟＋15分钟检测限：0.1ppb交叉反应率：AflatoxinB1100%AflatoxinB280%AflatoxinG1101%AflatoxinG2100%AflatoxinM125%五、液相色谱仪配置高效液相色谱仪

7、需要配制：PriboLab公司PribofastKRC柱后光化学衍生器，含有1ml反应池，纳米灯管254nm黄曲霉毒素专用色谱柱以下为我公司黄曲霉素检测相关产品订购信息：产品货号产品名称及规格数量IAC-010-3Pribofast,AflatoxinsB1,B2,G1,G225columns/pck3mL,wideborecolumn黄曲霉素总量免疫亲和柱3ml，25支/盒1盒M226PriboFast®226MultifunctionalcleanupcolumnforAflatoxinandzearalenone霉菌毒

8、素多功能净化柱，用于黄曲霉毒素玉米赤霉烯酮检测25支/盒1盒PriboFast®260PriboFast®260MultifunctionalcleanupcolumnforAflatoxinandzearalenone霉菌毒素多功能净化柱，用于黄曲霉毒素玉米赤霉烯酮检测25支/盒1盒PR