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1、红细胞免疫功能与运动河南大学体育学院运动人体科学试讲稿石建东1.以往人们对红细胞的认识1.1红细胞是血液中含量最多的一种有形成分。传统认为,红细胞功能主要有两种一为运输氧和二氧化碳,即呼吸功能一为对机体代谢所产生的酸碱物质起缓冲作用,即缓冲功能。2.红细胞免疫功能的发现及研究进展※2.120世纪30年代,Duke发现锥虫在抗血清及补体存在时可黏附到人类的红细胞上,推测在人的红细胞膜上存在有一种与免疫有关的物质。※2.21953年,NelsonRA[1]发现人类红细胞可与特异调理过的梅毒螺旋体及肺炎双球菌结合,称此为免疫黏附,并推测红细胞膜存在免疫黏附受体。※2.3196
2、3年,NishiokaK[2]又证实了这种人类红细胞所具有的免疫黏附功能是通过C3受体实现的。※2.41979年,FearonDT[3]首次在人红细胞膜上分离纯化了I型补体受体(complementreceptortypeI,CR1),并详细研究了该受体的特性,发现虽然红细胞膜上CR1的密度比白细胞低很多,但血液循环中红细胞总数要比白细胞大约多1000倍,因此95%以上的CR1都在红细胞膜上。※2.51981年,SiegelI等[4]发现红细胞有多种免疫功能,并在总结前人研究的基础上,提出了“红细胞免疫系统”的概念,认为红细胞免疫黏附(RCIA)是红细胞发挥免疫功能的主
3、要手段,开拓了免疫学研究的新领域。红细胞内有许多与免疫有关的物质(如CR1、CR3、CD58、CD59、DAF、SOD酶等),数目众多,自成系统。红细胞是血液循环中最重要的固有免疫细胞,具有识别、黏附、浓缩、杀伤抗原、清除循环免疫复合物(CIC)的能力,参与机体免疫调控,并有完整的自我调控系统。3.红细胞免疫功能的检测※3.1 红细胞天然免疫活性的测定方法☆3.1.1 红细胞C3b受体花环试验 可根据红细胞能免疫黏附补体调理过的抗原的原理对红细胞免疫黏附功能进行测定。用新鲜血清(含补体)致敏抗原(酵母菌或特定肿瘤细胞)后,黏附补体C3b等成分的抗原可被红细胞CD35识别
4、并发生天然免疫黏附形成花环状,用显微镜观察求出花环率(也称黏附率)。黏附率的高低可作为红细胞天然免疫功能高低的指标。红细胞C3b受体花环试验可在自家免疫性疾病、肿瘤疾病、感染性疾病、中医药及其他生理学范围内的红细胞免疫变化规律的研究中应用,也可作为临床多种疾病的病情、疗效、转归的辅助诊断指标之一。☆3.1.2 淋巴细胞转化试验 红细胞对特异性细胞免疫功能有调节作用,根据植物血凝素(PHA)能刺激淋巴细胞转化,而加红细胞与不加红细胞其转化率的对比试验可判定红细胞对淋巴细胞免疫功能调控能力的大小。※3.2 红细胞表面标志的种类与数量的测定方法☆3.2.1 PCR法和Hind
5、Ⅲ酶切技术测定红细胞CD35的分子数量 CD35(即CR1)是红细胞最重要的天然免疫物质,可根据CD35基因的相关序列表达与白细胞CD35不同对红细胞CD35密度相关基因的多态性变化进行测定。用特定的引物PCR扩增红细胞CD35基因,再用HindⅢ酶切扩增产物,可将红细胞CD35的密度表达分为高表达型(HH型)、中表达型(HL型)、低表达型(LL型)。酶切、电泳红细胞CD35的HH型为1条条带,HL型为3条条带,LL型为2条条带。研究发现,在肿瘤患者中,LL型比例明显上升。☆3.2.2 流式细胞技术和酶联免疫吸附(ELISA)试验 制备红细胞表面分子的单克隆抗体,并用荧
6、光标记。先进行荧光免疫反应试验,再用流式细胞仪测定,将平均荧光值作为红细胞表面分子数量多少的指标。若用酶标记红细胞表面分子的抗体,可进行ELISA试验测定红细胞表面分子的数量。这两种方法都可用于红细胞CD35、CD58、CD59、CD44s、CD55等天然免疫分子数量的测定。4.红细胞免疫的分子生物学基础经过长期的研究,发现红细胞具有很多与免疫有关的物质:※4.1 CR1、CR3[3,4],即红细胞膜上的I型补体受体CR1和Ⅲ型补体受体CR3。CR1是一种存在于多种细胞膜上的多态性膜糖蛋白。CR1在控制补体活性方面具有重要的调节功能。血内95%的CR1分布在红细胞膜上。
7、☆4.2.1 CD58即淋巴细胞功能相关抗原23(LFA23),是红细胞膜上一种糖蛋白分子。LFA23能与T细胞CD2结合,激活T淋巴细胞的免疫功能,并间接增强B淋巴细胞的免疫功能。 ☆4.2.2红细胞CD35识别抗原并清除循环中的免疫复合物，CD35又称红细胞膜表面补体受体(complementreceptor,CR),存在于红细胞膜表面的补体受体主要为Ⅰ型受体CR1,CR1属于补体调控蛋白,是一种分子质量为190～250ku的单链膜结合蛋白,能与补体系统中的C3b、C4b高亲和性地结合.☆4.2.3 红细胞CD35、CD58和CD59
