鲤春病毒血症病毒和水霉菌诱导氧化应激发生的研究-水产养殖专业毕业论文

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1、分类号密级华中农业大学硕士学位论文鲤春病毒血症病毒和水霉菌诱导氧化应激发生的研究OxidativeStressinducedbySpringViraemiaofCarpVirusandSaprolegniasis研究生：黄建学号：2012308110007指导教师：顾泽茂教授袁军法副教授专业：水产养殖研究方向：水产动物医学获得学位名称：农学硕士获得学位时间：2015年6月华中农业大学水产学院二。一五年六月万方数据华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文否如需保密，解密阴‘问年月口是否保密独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及

2、取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机拘的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。研究生张竞走Ⅱ搁：7_6心年刍月s日学位论文使用授权书本人完金了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同

3、意华中农业大学可以用不同方式在不弱媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论文)在解密后适用于本授权书。煳名：爹炙锄擗：印枷签名日期：2毋岱年‘月F疆签名日期：哆／矿‘年∥月厂。日万方数据鲤春病毒m症病毒和水霉菌诱导氧化应激发生的研究目录摘要一iAbstract．iii缩略语表vi第一章文献综述_．．11鲤春病毒血症病毒研究进展．．12水霉菌及水霉病研究进展一23氧化应激及其研究进展一34氧化应激

4、与病毒感染一65本研究的目的与意义一8第二章鲤春病毒血症病毒诱导氧化应激发生的研究．91材料与方法一91．1实验材料91．1．1细胞与病毒一91．1．2实验试剂一91．1．3实验仪器设备101．2实验方法111．2．1MTT法测定H202毒性111．2．2病毒感染．111．2．3细胞裂解样品收集121．2．4细胞裂解样品蛋白浓度测定121．2．5化学荧光法测定活性氧ROS水平．．121．2．6DNPH比色法测定蛋白质羰基含量．131．2．7双抗体夹心ELISA法测定8羟基脱氧鸟苷(8一OHdG)水平．．141．2．8TBA法测定脂质过氧化物一丙二醛含量161．2

5、．9FRAP法测定T-AOC171．2．10超氧化物歧化酶(SOD)活性测定．．191．2．11过氧化氢酶(CAT)活性测定21万方数据华中农业大学2015届硕士研究生学位论文1．2．12谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)活性测定．．221．2．13还原型谷胱甘肽(GSH)含量测定241．2．14实时荧光定量分析251．2．14．1细胞总I矾A的提取261．2．14．2反转录261．2．14．3Real．timePCR一271．2．15H202预处理EPC细胞后的病毒感染及SVCV病毒G基因的定量检测．281．3统计分析282结果与分析。292．1MTT法测定H202

6、毒性292．2H202刺激后EPC细胞氧化应激指标的测定．292．3SVCV感染EPC细胞后氧化水平指标测定302．4SVCV感染EPC细胞后抗氧化水平指标测定332．5SVCV感染后EPC细胞的抗氧化酶基因的转录分析362．6SVCV感染EPC细胞后ROS／T-AOC分析．382．75009MH202刺激EPC细胞2h后活性氧自由基水平测定392．8H202预处理后SVCV感染G基因的定量检测．393讨{仑．40第三章水霉菌感染鲤诱导氧化应激发生的研究一441材料与方法．441．1实验材料441．1．1实验动物．441．1．2实验主要试剂441．1。3实验仪器

7、设备．451．2实验方法451．2．1患病鲤体表水霉菌丝的显微观察．451．2．2患水霉病鲤和健康鲤血浆氧化应激指标的测定．451．2．3患病鲤的组织病理学分析．45万方数据鲤春病毒瓶症病毒和水霉菌诱导氧化应激发生的研究2结果与分析462．1患病鲤体表水霉菌丝体的形态观察．．462．2患水霉病鲤和健康鲤血浆氧化应激指标的测定462．3组织病理学观察．．473讨论48参考文献5l附表：硕士期间发表的论文62致{射．63Ill万方数据鲤春病毒JflL症病毒和水霉菌诱导氧化应激发生的研究摘要近年来，许多研究表明，多种微生物感染会诱导氧化应激的发生，氧化应激所导致的组织

8、损伤也是微生物感染的致病