伏马菌素b,1对小鼠室周器官影响的实验研究

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，研究生签名李剁轴师躲唧暂学院领导虢霹习哆∞西年3月弓／日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由

2、本人独立撰写，文责自负。研究生签名耕I耻导师躲唧奄膏砂肋8年王月3／日中文摘要伏马菌素B，对小鼠室周器官影响的实验研究摘要目的：真菌毒素对脑组织的损伤一直是生物医学界关注的热点领域，但目前有关伏马菌素Bl(FumonisinsBl，FBl)对脑室周器官损伤的研究国内外均未见报道。室周器官(circumventricularorgans。CVOs)是位于哺乳动物第三、四脑室壁上的几个微小器官，包括穹隆下器、正中隆起、终板血管器、脉络丛、连合下器、松果体后叶及最后区等。其中的穹窿下器(Subfomicalorgan，SFO)处缺乏血脑屏障，是血液中一些分子优先进入脑组织的位点。脉络丛分布于侧脑室

3、和第四脑室内，脉络丛上皮细胞紧密连接可以防止水溶性分子扩散进入脑脊液。由于CVOs对外界刺激较其他脑区更为敏感，是研究真菌毒素对脑组织损伤作用的理想位点。因此，本实验通过腹腔注射FBl构建实验动物模型，通过扫描电镜观察FB，对小鼠穹窿下器和脉络丛超微结构的形态学变化，同时采用免疫组织化学染色方法，观察对穹窿下器和脉络丛组织中COX．2和HSP70蛋白表达的影响，以期阐明FBl对CVOs一穹窿下器和脉络丛所产生的有害生物学效应。方法：1雄性BALB／c小鼠80只，体重18一--20g，由河北医科大学实验动物部提供。将其随机分为4组，分别为ld对照组、1d处理组、5d对照组和5d处理组，每组20

4、只。处理组小鼠给予腹腔注射FBl生理盐水溶解液，终浓度为2500lag／kg，终体积为200IJll。ld处理组仅注射1次，5d处理组连续腹腔注射5天。而ld对照组和5d对照组给予等体中文摘要积生理盐水腹腔注射，其他处理均与相应处理组相同。每组抽取5只通过扫描电镜观察FB。对小鼠穹窿下器和脉络丛超微结构的形态学变化，其余采用免疫组织化学染色方法，观察FBl对穹窿下器和脉络丛组织中COX．2和HSP70蛋白表达的影响，并分析其意义。2统计学分析：运用SPSSl3．0软件，数据采用方差分析。结果：1FBl处理对穹窿下器(SFo)的影响1．1扫描电镜结果：1．1．1对照组SFO超微结构特点1d、5

5、d对照组电镜观察SFO结构正常。主要结构特点为：低倍镜观察SFO为头尾方向的椭圆形的无纤毛区，其前后径约400gm，横径约300gm，周围为逐渐过度的少纤毛区。高倍镜下可见中央区的室管膜细胞呈卵石样突入到脑室腔，细胞呈圆形、六边形或五边形，分界清楚，细胞大小不一，直径3～101．tm。周围区域的室管膜细胞扁平，表面光滑，室管膜细胞表面可见微绒毛结构。1．1．2处理组SFO超微结构的变化FBI处理后1天与对照组比较，电镜观察未发现明显改变。低倍镜下SFO大体形态无改变。高倍镜下中央区的室管膜细胞呈卵石样突入到脑室腔，细胞圆形、六边形或五边形结构清楚。周围区域的室管膜细胞扁平，表面光滑，室管膜细

6、胞表面可见微绒毛结构。FBl处理5天组，可见SFO细胞界限不清，表面可见颗粒状物质，周边纤毛出现粘连、倒伏现象。细胞间连接不清，细胞表面微绒毛粘连、倒伏，细胞表面火山口样和不规则破损，表面出现颗粒状物质。细胞形中文摘要态结构边界不清，细胞表面出现类似淤泥状物质。1．2COX．2蛋白在穹窿下器室管膜细胞中的表达COX-2蛋白阳性染色呈棕黄色颗粒状，定位于室管膜细胞胞浆内。1d对照组、5d对照组和ld处理组仅见极少数室管膜细胞COX．2蛋白呈阳性表达，各组表达率分别为1．15±0．25％、2．32±0．31％和5．48±O．76％，两两比较均无明显差异(p>O．05)。而在5d处理组COX．2蛋

7、白阳性细胞数量明显增多，阳性细胞表达率达52．5949．08％，显著高于5d对照组和ld处理组，差异显著(p0