茯苓化学组分拆分和不交叉性探究

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1、茯苓化学组分拆分和不交叉性探究［摘要］通过水蒸气蒸馏法、水提醇沉法、液液萃取法和大孔吸附树脂柱色谱法的联合应用，建立茯苓化学组分的拆分方法，利用主成分分析和聚类分析方法对茯苓化学拆分组分进行不交叉的定性分析；采用夹角余弦、平方欧式距离和生药峰面积交叉分析法对茯苓化学拆分组分进行不交叉的半定量分析。结果表明，将茯苓化学成分拆分为多糖组分、石油醚萃取组分、乙酸乙酯萃取组分、树脂醇洗组分和树脂水洗组分，且各化学拆分组分差异度在80%以上，并对其主要成分进行标识。该实验建立茯苓化学组分的拆分方法，工艺具有良好的稳定性和重复性，能够对茯苓全部化学成分进行拆分，并且首次采用半定量分析

2、方法对组分之间的不交叉性进行了分析。［关键词］茯苓；化学拆分组分；不交叉性分析［收稿日期］2013-07-23［基金项目］国家重点基础研究发展计划(973)项目(2013CB531803);2013辽宁省高等学校创新团队项目(LT2013020)［通信作者］窦德强，Tel:(0411)87406497，E-mail：deqiangdou@126.com茯苓化学组分拆分和不交叉性探究［摘要］通过水蒸气蒸馏法、水提醇沉法、液液萃取法和大孔吸附树脂柱色谱法的联合应用，建立茯苓化学组分的拆分方法，利用主成分分析和聚类分析方法对茯苓化学拆分组分进行不交叉的定性分析；采用夹角余弦、平

3、方欧式距离和生药峰面积交叉分析法对茯苓化学拆分组分进行不交叉的半定量分析。结果表明，将茯苓化学成分拆分为多糖组分、石油醚萃取组分、乙酸乙酯萃取组分、树脂醇洗组分和树脂水洗组分，且各化学拆分组分差异度在80%以上，并对其主要成分进行标识。该实验建立茯苓化学组分的拆分方法，工艺具有良好的稳定性和重复性，能够对茯苓全部化学成分进行拆分，并且首次采用半定量分析方法对组分之间的不交叉性进行了分析。［关键词］茯苓；化学拆分组分；不交叉性分析［收稿日期］2013-07-23［基金项目］国家重点基础研究发展计划(973)项目(2013CB531803);2013辽宁省高等学校创新团队项目

4、(LT2013020)［通信作者］窦德强，Tel:(0411)87406497，E-mail：deqiangdou@126.com［作者简介］林分，硕士研究生，E-mail:jujul3052781067@163.com中药活性或有效部位的研究，一般需要对水煎液或醇提液进行拆分，以评价哪一部位的活性最强。但各拆分部位之间的成分交叉性鲜有评价，为进一步活性组分的最终确定增加了不确定因素。本实验以茯苓为例，通过几种方法尝试，建立其拆分组分不交叉性评价的新方法，为后续的拆分组分性味评价奠定基础。茯苓为多孔菌科植物真菌获苓Poriacocos（Schw.）Wolf的干燥菌核，性平

5、，味甘、淡，主入脾经，具有利水渗湿、健脾宁心的作用，主要含有多糖、三萜酸类等有效化学成分［1-2］。根据文献报道，茯苓中多糖具有免疫增强作用［3］，三萜类物质具有抗炎［4］和利尿作用［5］，本实验对茯苓的全部化学成分进行组分拆分，通过多种方法对化学拆分组分进行定性和半定量的不交叉分析，并对拆分组分的化学成分进行表征，为拆分组分的不交叉分析提供一种新的标识方法。1材料FD-EA-50冷冻干燥机（北京博医康实验仪器有限公司），DZF-6050真空干燥箱（上海一恒科技有限公司），YQ-A3-SS-048高速冷冻离心机（Eppendorf公司），RE-85Z旋转蒸发器（巩义市英峪

6、予华仪器厂），HH-S型水浴锅（巩义市予华仪器有限责任公司），AgilentHPLC1260高效液相色谱仪（安捷伦科技有限公司），SHZ-D（III）循环水式真空泵（巩义市英峪予华仪器厂），KQ-250DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），PCJ-10系列超纯水机（成都品成科技有限公司），CP225D电子天平（Sartorius公司）。石油醚（沸点60〜90°C）（天津市进丰化工有限公司）、乙酸乙酯（天津市进丰化工有限公司）和磷酸（天津市大茂化学试剂厂）均为分析纯，甲醇（天津市大茂化学试剂厂）和乙腈（OceanpakAlexativeChemical）均为色谱

7、纯，超纯水，食用乙醇，D-101型大孔吸附树脂（沧州宝恩吸附材料科技有限公司）。茯苓，2012年11月购自云南省腾冲县，经辽宁中医药大学药用植物教研室王冰教授鉴定为多孔菌科真菌茯苓P.cocos的干燥菌核。2方法与结果2.1茯苓化学组分拆分方法的建立称取茯苓粉末100g，加水至生药材的10倍量，浸泡2h,加热回流2h，趁热用滤布过滤；残渣再加水至生药材的10倍量，加热回流1h。采用水蒸气蒸馏法，即得挥发油。蒸馏后的水煎液减压浓缩至生药材的1倍量，加95%乙醇，使醇沉浓度为80%,0〜5°C静置过夜，离心（8000r•min-1