达亚美操作程序

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1、ABO正/反定型和RhD血型检测卡操作规程样本要求：血样最好用枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。若需要川血淸替代血浆进行检测时，应在川前离心，1500gX10min,以免纤维蛋白物残余十扰反应结果。样本准备：5%样本红细胞制备：压积红细胞25u1或全血50Ml悬浮于0.5ml达亚美2号稀释液中。々I一I々卜If一j令配套试剂：ABO正/反定型和RhD血型检测卡2号稀释液标准红细胞A,和B操作步骤：1)取50ulAUB标准细胞(0.8%)分别加入AuB管中。2)取50Pl血清或血浆加入B管中。3)取10ul5%样本红细胞加入A,B，D，Ct

2、l管中。4)离心10分钟。判读结來。记录。结果解释：1、阳性(+):细胞在凝胶表面凝集成一条红线或散布在凝胶屮。阴性(一)：细胞沉积在管底。双相(d.p.)：既冇阳忡结果，同时也冇明性结果。溶血(Hemo):红细胞溶解，作为阳性结果对待。2、ABO血型判断血型抗原与抗血清反应与A，、B细胞反应抗-A抗-BAiBAA++++————+/++++BB—+++++/++++—ABA,B,AB++++++++——0H——+/+++++/++++3、KhD血型判断+++〜++++土〜++阴性RhD阳性RhD弱阳性RhD阴性抗体筛选操作程序操作规程（

3、间接抗人球法IAT）样本要求：血样M好川枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。若需要用血淸替代血浆进行检测时，极在用前离心，1500gX10min,以免纤维蛋白物残余T扰反放结果。配套试剂：低离子抗人球蛋L1卡2号稀释液抗体筛选标准红细胞抗原格局图操作步骤：1）取50u1试剂红细胞悬液至低离子/抗人球卡各微管中。2）取25ul待检血浆/血清加入各管中。3）37T孵育15mine4）离心10分钟。判读结果。记录。结果解释：1、阳性（+）:细胞在凝胶表而凝集成一条红线或散布在凝胶屮。叨性（一）：细胞沉积在管底。双相（d.p.）：既有阳性结果，同吋

4、也有阴性结果。溶血（Hemo）:红细胞溶解，作为阳性结果对待。3+2+1++/-d.p.Hemo.2、抗体筛选结果：阴性表示被检血浆/血清未发现不规则抗体；阳性表示有不规则抗体。将结果与试剂红细胞的抗原格局图比对，初步确定抗体类型，并进一少检测以鉴定抗体。交叉配血操作程序操作规程样本要求：血样最好川枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。若需要用血清替代血浆进行检测时，应在用前离心，15()0gXl()min,以免纤维蛋白残余干扰反应结果。样本准备：0.8%样本红细胞制备：取10Ml压积红细胞至lml达亚笑2号稀释液屮。配套试剂：低离子抗人球蛋

5、G卡2号稀释液操作步骤：1)取0.8%供体红细胞悬液50u1至低离子/抗人球卡主侧管中；取0.8%病人红细胞悬液50111至低离子/抗人球卡次侧管中。2)取25ul病人血浆/血清加入主侧管中；取25ul供体血浆/血清加入次侧管中。3)37°C孵育15min。4)离心10分钟。判读结果。记录。结果解释：1、阳性(+):细胞在凝胶表面凝集成一条红线或散布在凝胶屮。阴性(一)：细胞沉积在管底。双相(d.p.)：既有阳性结果，同吋也有阴性结果。溶血(Hemo):红细胞溶解，作为阳性结果对待。—d.p.Hemo.2、交叉配血结果：叨性表示配血成功；

6、阳性表示配血不成功，需进一步检测。新生儿溶血症的“三项试验”操作规程样本要求：血样最好用枸橼酸、EDTA或CPD-A抗凝。若需耍用血清替代血浆进行检测时，应在用前离心，1500gX10min,以免纤维蛋白残余干扰反应结果。样本准备：0.8%样本红细胞制备：取10u1压积红细胞至lml达亚美2号稀释液中。配套试剂:低离子/抗人球卡，2号稀释液，A,、B标准红细胞，抗体筛选标准红细胞,DiaCidel洗涤液(用前以蒸馏水1:10稀释)，DiaCidel放散液，DiaCidel缓冲液操作步骤：红细胞直接抗球蛋白试验(DAT)1.取新牛儿脐带血，

7、川达亚美2号稀释液(ID-Diluent2)配0.8%的红细胞悬液。2.在低离子/抗人球卡中加入50pl上述红细胞惡液。3.离心10分钟，判读结果。记录。游离试验(IAT)1.取新生儿脐带血，离心，取血浆。2.在低离子/抗人球卞•中分別加入50jjI0.8%的标准红细胞。3.各孔均加入25pl新生儿脐带血清。4.376C孵育15分钟，离心10分钟。判读结果。记彔。释放试验(IAT)1用等渗生理盐水洗涤红细胞-次，至少需要压积红细胞Imlo2用DiaCidel洗涤液(工作浓度)洗红细胞4次。3最后一次洗涤后，小心倾除上淸液。可另用试管保贸部

8、分上淸液，以检测是否存在不规则抗体。4将lmlDiaCidel放散液加至红细胞中，充分混匀。5立即离心1分钟，转速900Xg(3000rpm)o6将放散液移入干净试管。7加5滴(250P1)D