豆科植物中结瘤信号通路蛋白nsp2相互作用蛋白ipn的功能分析

《豆科植物中结瘤信号通路蛋白nsp2相互作用蛋白ipn的功能分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、类号密级华中农业大学硕士学位论文豆科植物中结瘤信号通路蛋白NSP2相互作用蛋白IPN2的功能分析FUNCTIoNALANALYSISOFNODULATIONSIGNALINGPATHWAY2INTERACTIoNPRoTEINIPN2INLEGUME硕士研究生：黄小琴学号：2012304110024指导教师：张忠明教授专业：微生物学研究方向：共生固氮分子生物学获得学位名称：理学硕士获得学位时间：2015年6月华中农业大学生命科学与技术学院二O一五年六月万方数据华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文殛如需保密，解密时间年月曰是否保密锣声明I删炒本人声明所呈交的论文是我个人在导

2、师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，酴了文孛特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构．的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贾献均已在论文中做了骥确的说明，并表示了谢意。研究生签名：巷_，琴时阍：矽够年匆月}日学位论文使用授权书本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版，并提供目录检索和阕览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。

3、本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论文)在解密后适鳎予本授权书。凇黼张营{，琴鼢张猢签名日期：为l≮-年幻月{日签名日期：阳}$年易月}日万方数据豆科植物中结瘤信号通路蛋白NSP2相互作用蛋白IPN2的功能分析目录摘要．．iAbstract．．ii缩略语表iv1一前言日U吾．1．11．1共生固氮的意义．11．2根瘤的形成过程．11．3豆科植物中结瘤因子信号传导途径．31．3．

4、1结瘤因子的感知一31．3．2结瘤因子信号的级联放大．．41．3．3根瘤形成早期表皮和皮层的应答61．3．4结瘤自主调控一71．4结瘤起始基因和相关转录因子．．81．4．1结瘤起始基因NIN基因的结构与功能．81．4．2结瘤信号通路蛋白的结构与功能91．4．3MYB转录因子的结构与功能．．101．5DNA与蛋白之间的相互作用．．111．5．1凝胶阻滞(EMSA)121．5．2DNaseI足迹一121．6研究的目的和意义122材料与方法一132．1材料．132．1．1质粒和菌株132．1．2植物材料142．1．3分子生物学和植物转化相关试剂152．1．4基本分子生物学操作方法．152．1

5、．2主要培养基．152．2方法．17万方数据华中农业大学2015届硕士研究生学位论文2．2．1酵母双杂交验证蛋白相互作用．172．2．2双分子荧光互补(BiFC)分析202。2．3多分子荧光互补(meBiFC)分析．．2l2．2．4毛根转化和鉴定．212．2．5凝胶阻滞实验(EMSA)．223结果与分析303．1MtIPN2和MtlLK蛋白和基因的结构特性．303．2MtIPN2和MtlLK与MtNSP2蛋白在酵母体内的相互作用333．3MtNSP2和MtIPN2或MtILK与在植物细胞中相互作用353．3．1双分子荧光互补(BiFC)验证MtIPN2和MtlLK与MtNSP2的相互作

6、用．．353．3．2多分子荧光互补(mcBiFC)验证MtlPN2和MtlLK与MtNSP2的相互作用～373．4MtlPN2和MtlLK的亚细胞定位393．5体外LjIPN2和LjNSPl与NIN启动子结合一414讨论、总结及展望．．434．1总结．434．2讨论444．3展望46参考文献．．47附录：本试验所用引物．．55致{射一56II万方数据豆科植物中结瘤信号通路蛋白NSP2相互作用蛋白IPN2的功能分析摘要豆科植物和根瘤菌建立共生关系，形成新的植物器官根瘤，为植物提供可利用的氮源。豆科植物和根瘤菌之间的相互作用包括根瘤菌的侵染，根瘤原基的形成和固氮根瘤的形成，都受到宿主的严格

7、调控。近几年来，从模式豆科植物百脉根和苜蓿中鉴定出一系列参与结瘤因子感知和信号传导的关键基因。其中，结瘤信号通路蛋白NSPl和NSP2是共生信号转导途径中关键的信号蛋白，都属于GRAS家族转录因子。为了研究这类转录因子在根瘤形成过程中的调控机制，本文在从百脉根中分离到与LjNSP2相互作用蛋白LjIPN2的基础上，开展了苜蓿中与LjIPN2同源物MtIPN2的功能及作用机制研究，具体研究结果如下：1．用LjIPN2的核苷酸序列在http：／／w