hplc法测定柴胡皂苷前处理酸化条件的优化及相关分析方法的评价

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1、HPLC法测定柴胡皂苷前处理酸化条件的优化及相关分析方法的评价胡杰，刘晓节，秦雪梅*，张丽增，郭小青（山西大学化学化工学院药学系，山西太原030006；）[摘要]目的:优选HPLC法测定柴胡药材中柴胡皂苷a、d前处理的酸化条件，并对相关分析方法进行评价。方法:采用单因素及正交实验优选柴胡皂苷a、d前处理的酸化条件和最佳提取条件，并对相关分析方法进行比较评价。结果:最佳酸化条件为：8%盐酸，30℃反应18h，再用8%KOH溶液调节pH至中性；样品最佳提取条件为：取药材粉末0.5g，加8%氨-甲醇溶液25ml，超声提取

2、3次，每次45min。结果表明本文方法灵敏度高，分离度好，色谱图杂质峰较小，目标峰面积较大。结论:优选的含量测定方法可作为中药柴胡质量控制的依据。[关键词]柴胡皂苷；HPLC；酸化条件；方法评价OptimizationofacidconditionsforHPLCdeterminationofSaikosaponinandevaluationonrelatedmethodsHUJie,LIUXiao-jie,QINXue-mei,ZHANGLi-zeng,GUOXiao-qin（SchoolofChemistrya

3、ndChemicalEngineering,ShanxiUniversity,Taiyuan030006,China;）Abstract：Objective:Tooptimizepre-treatmentacidconditionfordeterminationofsaikosaponin-aand-dinRadixBupleuribyHPLC,andevaluaterelevantmethods.Methods:Thesinglefactorandorthogonalexperimentaldesignswere

4、employedtooptimizeacidconditionandextractionconditionforsaikosaponin-aand-d.Results:Theoptimalacidconditionsareasfollows:thesampleacidifiedwith8%hydrochloricacidat30℃for18h,andthen8%KOHsolutionisaddedtoadjustthepHneutral.Andthebestextractionconditionisthatthep

5、ower0.5gaddedwith8%NH3-CH3OH25mlultrasoundextract3times,eachextractionlasting45min.Theresultsshowthatthismethodissensitive,withgoodresolution,lessimpuritypeaks,andbiggerobjectpeakarea.Conclusion:Theoptimizedmethodforthedeterminationofsaikosaponinaanddcouldbeus

6、edasthebasisforqualitycontrolofRadixBupleuri.Keywords：saikosaponin；HPLC；Acidificationconditions,MethodEvaluation柴胡为伞形科柴胡属植物北柴胡(BupleurumchinenseDC.)和狭叶柴胡(B.scozonerifoliumWilld.)的干燥根，具有解表和里、疏肝解郁、升举阳气之功效[1]。柴胡皂苷为其主要有效成分之一，其中以柴胡皂苷a、d（Saikosaponin-aand-d，简称SSa、SS

7、d）的药理活性较强，具抗炎、保肝、降低血中胆固醇等作用[2]。虽有较多文献报道HPLC法测定SSa、SSd的含量[3][4]，但因其分子结构中只含一个双键（见图1），处于紫外末端吸收，采用HPLC-UV法检测波长大多在210nm下，杂质峰干扰严重，检测灵敏度低，方法不稳定；而HPLC-ELSD法[5]检测限高且仪器费用昂贵，不宜普及；另有报道[6]SSa、SSd在酸性条件下易水解开环成共轭体系（见图1），一定温度下可定向转化为柴胡皂苷b1、b2（Saikosaponin-b1and-b2，简称SSb1、SSb2），

8、使检测波长红移至254nm，紫外吸收增强，检测灵敏度提高，但目前该方法的样品前处理酸化条件不一，在酸的浓度、酸化反应时间及酸化反应温度等方面都存在很大差异，对测定结果影响较大。因此，SSa、SSd的含量测定方法至今尚不完善，历版《中通讯作者：秦雪梅（1964-），女，教授，主要从事中药质量标准与代谢组学研究。Tel:0351-7011202,Email:qi