资源描述：
《用低交换容量聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂柱色谱分离中性氨基酸》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、用低交换容量聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂柱色谱分离中性氨基酸Vo1.222001年l2月高等学校化学CHEMICALjOURNALOFCHINESEUNIVERSITIESNo.122l00～2103用低交换容量聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂柱色谱分离中性氨基酸刘菊湘刘国栋阎虎生程晓辉何炳林姜根华.杨国英.(1.南开大学高分子化学研究所,吸附与分离功能高分子材料国家重点实验室,天津3000712.天津药业有限公司,天津300161)摘要遥过磺化苯乙烯一--L烯苯共聚物或商品化的聚苯乙烯型强酸性阳离子变换树
2、脂(OOl×7)的逆磺化反应.得到一系列不同交换容量的聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂.研究了丙氨酸和缬氨酸及缬氨酸和亮氨酸在这些树脂拄上的色谱分离.结果表明,用两种方法得到的树脂对丙氮酸和缬氨酸的色谱分离性能基本相同;同时中性氨基酸与聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂之间的作用包括离子作用和琉水作用.且二者之间存在协同作用.树脂的变换容量较低时对中性氨基酸有更好的分离性能.关键词氨基酸l离子交换树脂;疏水作用色谱审围分类号TQ028.3文峨标识码A文章鳙号0251—0790(2001)12—21OO一04由蛋白
3、质水解液分离提取氨基酸是获得天然氨基酸的重要方法之一[1].蛋白质的水解液中往往含有多种氨基酸,部分氨基酸可用等电点沉淀法及沉淀荆沉淀法分离,其它几组氨基酸由于其化学及物理性能非常接近,分离较难分离中性氨基酸常用聚苯乙烯型强酸性阳离子交换色谱法.一般认为其分离原理是氨基与树脂上的磺酸基存在静电作用,由于不同氨基酸氨基的碱性存在微小差异,故可通过柱色谱分离.前文~7,B1表明,在配体交换色谱分离氨基酸时,氨基酸的侧基与树脂的骨架可能存在疏水作用.文献[6]用聚苯乙烯型强酸性阳离子交换色谱分离氨基酸时,也曾提出
4、氨基酸侧基的大小或极性可能对分离有贡献因此,在用聚苯乙烯型强酸性阳离子交换柱色谱分离氨基酸时,氨基酸的侧基与树脂骨架之间的疏水作用可能对分离有贡献.目前阳离子交换色谱分离氨基酸所用的树脂都为聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂,其特点是交换容量很高.如果疏水作用对分离确实有贡献,则分离氨基酸所用聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂的交换量并非越高越好.本文通过合成不同交换容量的聚苯乙烯受强酸性阳离子交换树脂,通过研究交换容量对分离的影响来研究疏水作用对分离的影响,并合成出分离性能更好的强酸性阳离子交换树脂.1实验部分1
5、.1屎辩及仪器001×7凝胶型聚苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂(南开大学化工厂),体积交换量2.02mmol/mL,粒度40~60目.苯乙烯(工业品)和二乙烯苯(工业品,二乙烯苯含量为51.2,南开大学化工厂).其它试剂均为市售分析纯.HL一1恒流泵和BSZ一160自动部分收集器(I-海沪西仪器厂),Uv一754塑紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂).1.2通过赘化及遨璇化反应嗣备不同交换容量的强酸性阳离子交换树脂含7二乙烯苯的苯乙烯.--L烯苯凝胶共聚物参照文献[9]方法制备.将30g苯乙烯-二乙烯苯凝胶共
6、聚物在250niL三口瓶中用30g1,2.二氯乙烷溶胀10mln,加人100g9Z.5的浓硫酸,慢速搅动,8O℃下反应一定时间后取样,根据文献[9]方法测定其交换容量.牧稿日期,2000一l0.1基金顼臣:天谇市重点科学基金项臣(批准号98~01411)资助联暴人简介闻虎生(1959年出生).男,博士.教授,博士生导师.从事功能高分子和多肚台成研究.E-mailth.a.n@ec蛳刘菊湘等:用低变换客量聚苯己烯型强酸性阳离子交换树脂柱色谱分离中性氨基酸将100g001×7树脂(湿)悬浮于200mL5稀硫酸中
7、,于103℃搅拌反应一定时间后取样,测定其交换容量.1.3氨基酸的柱色谱分离及分析鉴定将不同交换容量的H型磺酸树脂100mL装入2.0cmX50cm的玻璃柱中,将每种氨基酸的量相当于树脂柱交换容量5(物质的量分数)的丙氨酸和缬氨酸或缬氨酸和亮氨酸用0.1mol/LHCI溶解成0.2mmol/mL的混合氨基酸溶液注入柱顶部,进样速度2mL/min.用2倍于上述溶液体积的蒸馏水以相同流速洗至中性,用0.2moi/LNHC1洗脱荆以1mL/min的速度洗脱,自动部分收集器牧集,每5mL收集一管.每管各取1o皿样品
8、,分别点样于新华层析纸上,用(正丁醇)/v(乙醇)/(乙酸)/v(水)4/1/1/2的展开剂展开,1.0茚三酮/乙醇显色.剪下斑点,用4mL(O.1cusO)/v(75乙醇)一4/76的脱色剂脱色.测定脱色液在570D.m波长下的吸光值,再根据标准曲线计算氨基酸的含量.2结果与讨论2.1低交换窖■强蘸性阳离子交换树脂的制备用92.5的硫酸磺化台7二乙烯苯的苯乙烯一二乙烯苯共聚物,不同的磺化时间可以得到不同交换容量
