对艾弗里实验表述的质疑

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1、对艾弗里实验表述的质疑要讲DNA是主要的遗传物质了。集备时,组里老师讨论后感觉有困惑。教材叙述:艾弗里及其同事对S型细菌中的物质进行了提纯和鉴定。他们将提纯的DNA、蛋口质和多糖等物质分别加入到培养了R型细菌的培养基中,结果发现:只有加入DNA,R型细菌才能转化为S型细菌,并且DNA的纯度越高,转化就越有效;也就是只有DNA才与转化相关,且DNA纯度与转化成正相关。由此提出不同与当时大多数科学家观点的结论:DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。按照教材所述,哪怕纯度不够,当时人们也没有怀疑蛋白质起作用的必要了,因为艾弗里及其同

2、事已经用实验排除了啊。是当时的科学工作者死板吗?读了刘永生老师的博文才知道,不是当时的科学家死板,也不是我们理解能力太差,而是教材的问题。刘永生:人教版高中生物课标教材(以下均简称“课标教材”)对艾弗里实验的表述,不符合生物科学发展的史实。1Avery实验简介Avery等在1944年发表了《StudiesonthechemicalnatureofthesubstanceinducingtransformationofpneumococcalTypes:Inductionoftransformationbyadesoxyribonuc

3、leicacidfractionisolatedfrompneumococcustypeIII》(以下简称“论文”)。论文第一次用实验表明了DNA是遗传物质。让我们先简单冋顾论文所述的实验过程。1.1“转化因子”的纯化[1]1.1.1原始材料:离心得到S型肺炎双球菌(Streptococcuspneumoniae)o将离心得到的S型细菌加热杀死。1.1.2从原始材料获得具有转化活性的提取液:用氯化钠溶液洗原始材料。将清洗后的原始材料置于含脱氧胆酸钠的氯化钠溶液中,振荡,离心去除细胞,得到S型细菌的粗提取液。向粗提取液中添加无水酒精,

4、析出纤维状物质。将纤维状物质再溶于氯化钠溶液中,得到S型细菌的提取液(具有转化活性)。1.1.3去除提取液中的蛋白质和多糖:使用Sovag法去除提取液中的蛋白质。使用酶去除提取液中的荚膜多糖。再次使用Sevag法去除提取液中的蛋白质。向提取液中添加无水酒精,析出纤维状物质(具有转化活性)。通过以上步骤,Avery等得到了具有转化活性的纯化的“转化因子”。1.2纯化“转化因子”的鉴定[1]1.2.1纯化的转化因子与双缩月尿试剂和米龙氏试剂反应均为阴性,与二苯胺试剂反应为阳性。1.2.2纯化的转化因子中N/P值和DNA中N/P值相近。1

5、.2.3经纯化的胰蛋白酶、糜蛋白酶、核糖核酸酶处理后,纯化的转化因子仍具有转化活性;经未纯化的DNase处理后,转化因子失去转化活性。1.2.4免疫分析表明:纯化的转化因子既不与肺炎双球菌蛋白抗体反应,也不与荚膜多糖抗体反应。1.2.5超高速离心与电泳的结果均表明,纯化的转化因子成分均一,紫外吸收峰在260nm(和核酸相同)。根据上述结果,Avery等推断转化因子是DNA。1.3转化因子是DNA的最终证明[2]1946年,Avery等获得了DNase,经DNase处理后的转化因了丧失了转化活性,由此确定了转化因子是DNA。2课标教材

6、对Avery实验的表述[3]为了弄清楚转化因子,艾弗里及其同事对S型细菌中的物质进行了提纯和鉴定。他们将提纯的DNA、蛋口质和多糖等物质分别加入到培养了R型细菌的培养基中,结果发现:只有加入DNA,R型细菌才能转化为S型细菌,并且DNA的纯度越高,转化就越有效;如果用DA酶分解从S型细菌中提取的DNA,就不能使R型细菌发生转化。3课标教材对Avery实验的表述不符合生物科学发展史实3.1课标教材的表述误解了Avery实验的设计思路Avery实验的思路是:先纯化转化因子,然后对纯化的转化因子进行鉴定。这在论文屮已经明确指岀:Them

7、ajorinteresthascenteredinattemptstoisolatetheactiveprinciplefromcrudebacterialextractsandtoidentifyifpossibleitschemicalnaturcoratleasttocharacterizeitsufficientlytoplaceitinageneralgroupofknownchemicalsubstances.(关注焦点放在了:从细菌粗提液中分离出具有转化活性的物质;我们期望能够对这种物质进行鉴定,或者至少获得足够的关于

8、该物质的描述性信息,从而将其归属于某类已知的化学物质。)Avery原始实验抓住了转化因子具有转化活性这一核心功能。首先明确S型细菌的粗提取液具有转化能力,然后通过一定的方法逐步去除粗提取液中的某种成分。如果去除某种成分后丧失转化能力,

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