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1、宁夏产栽培秦艽中龙胆苦苷分布状态研究白晓朝（宁夏师范学院化学与化学工程学院宁夏固原756000）【中图分类号】R932【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2010）23-0033-02【摘要】目的研究宁夏产栽培秦艽中龙胆苦苷的分布状态。方法学采用HPLC测定宁夏不同产地栽培秦艽不同部位龙胆苦苷的含量。结果根部龙胆苦苷的含量高于地上其他部位;部分秦艽的花、叶或茎所含的龙胆苦苷己接近或超过中国药典2%的要求。结论考虑对宁夏产栽培秦艽全草资源进行开发利用。【关键词】栽培秦艽龙胆苦苷HPLC秦艽（Gentiana）为龙胆科龙胆属秦艽组植
2、物［1］的干燥根［2］。始载于《神农木草经》，作为药用已有两千多年的历史，临床上常用于风湿痹痛，筋脉拘挛，骨蒸潮热，湿热黄疸,小便不利等病症的治疗［3］。近年来，随着对秦艽药材需求量的增加,以致过度采挖，野生资源近于濒危状态，被列为国家三级重点保护的野生药材［4］,为了补充药用资源，进行人工栽培已刻不容缓。木研究首次以秦艽中的药效成分龙胆苦苷的含量为指标，采用HPLC对宁夏不同产地栽培秦艽的不同部位中龙胆苦苷含量进行测定，为保证宁夏栽培秦艽的品质和综合开发宁夏栽培秦艽资源提供科学依据。1仪器与试药LC-5A高效液相色谱仪（日东岛津公司）；Z
3、Q-2K（SY-36）超声波清洗器（上海声源仪器有限公司）；GoldS54紫外-可见分光光度计（上海棱光科学器材有限公司）。栽培秦艽均采自宁夏境内，且经宁夏师范学院医学院中药研宄室潘怀义教授鉴定；龙胆苦苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号:0770-200203,用归一法标定,纯度为100%）。流动相甲醇为色谱纯（丙安化学试剂厂），水为去离子水。其余试剂均为分析纯。2方法与结果[5〜6]2.1对照品与供试品溶液的制备精密称取龙胆苦苷对照品5.3mg置10mL容量瓶，加甲醇制成0.53mg·mL-l对照品溶液。取宁夏产栽培秦亢
4、研成细粉，过400筛，精密称取细粉各约0.5g,加甲醇20mL,加热冋流30min,放冷,过滤，滤液减压冋收至干，残渣用适量甲醇溶解，过滤，移至50mL量瓶，加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取ImL于5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即为供试品溶液。2.2最大吸收波长的确定取一定量的对照品溶液，在200-350nm波长范围内进行光谱扫描，结果表明，龙胆苦苷在254nm有最大吸收,故选其为测定波长。2.3含量测定2.3.1色谱条件色谱柱为LichrospherC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-水(1:2);流
5、速l.lmL·min-l,检测波长254nm;柱温为室温(25°C);进样量10μL;理论塔板数按龙胆苦苷计算应不低于2000。在该色谱条件下，龙胆苦什和其他成分冇较好分离。2.3.2线性关系考察精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8、10&mu上按上面“2.3.1”项色谱条件进样，记录峰面积，以龙胆苦苻峰面积A为纵坐标，进样量X为横坐标绘制标准曲线，得冋归方程:A=2.14×105X6.50×103(r=0.9994),线性范围为0.53-5.30μg。2.3.3精密度试验精密吸取对照品溶液
6、10μL,连续进样5次，以色谱峰面积计算，得RSD=1.18%、表明仪器的精密度良好。2.3.4重复性试验取冋一批号样品细粉5份,每份约0.5g,精密称定，按“2.1”项下步骤操作，测得龙胆苦苷的平均含量为10.82%,RSD=2.23%。表明分析方法精密度良好。2.3.5回收率试验取同一批号样品5份,每份约0.5g,精密称定,分别精密加入龙胆苦苷对照品适量，按“2.1”项下步骤操作测定，计算冋收率为97.75%,RSD=1.08%o2.3.6稳定性实验取冋一批号样品，配制成供试品溶液后,分别于1、3、5、7、9、11、12h进行测定
7、，结果表明:供试品溶液在12h内比较稳定。2.3.7样品测定取不同产地不同部位的宁夏产栽培秦艽样品，按“2.1”项操作制备成供试液，精密吸取10μL,按“2.3.1”项色谱条件测定，以外标法计算样品中龙胆苦苷的含量。3讨论3.1测定结果表明，宁夏不同产地栽培秦艽中龙胆苦苷的含量稍奋差别，其中六盘山区最高，九华山区次之，贺兰山区最低。且龙胆苦苷主要分布在根部,其次为花,叶和茎最少。3.2秦艽药用部位为根，但部分宁夏产秦艽的花、叶和茎中龙胆苦苷的含量也能满足中国药典2%的要求，故可考虑采用花、叶、茎与根-冋入药,既可扩大药源，又可以充分利
8、用宁夏栽培秦艽资源。3.3本研究还发现，栽培秦艽中龙胆苦苷的含量与多种因素有关，如产地、不冋部位、采集季节、生长年等。关于龙胆苦苷含量随诸多因素的变化规律正在进一步研究中。参考文
