马蓝离体无菌系构建影响因子的探索

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1、为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。马蓝离体无菌系构建影响因子的探索　　摘要：本试验采用组织培养的方法，对马蓝愈伤组织诱导进行探索、研究，并利用正交设计对马蓝愈伤组织诱导的培养基配方进行筛选，建立了马蓝离体无菌系。本试验为提高马蓝的生产效率、降低生产成本提供技术支持，并为今后马蓝组培快繁技术的研究提供一定的科学依据。　　关键词：马蓝；组织培养；正交设计；愈伤组织诱导率　　中图分类号：文献标识码：ADOI：/　　

2、引言　　马蓝为爵床科，属多年生草本植物，又名板蓝根、南板蓝、蓝靛、大青叶。南板蓝根具有清热解毒、凉血的功效，具有良好的药用价值。近几年南板蓝根野生资源出现枯缺，原料供不应求，价格上涨。因此开发南板蓝根野生资源，进行人工栽培，产业化种植，具有很好的�l展前景。　　1材料与方法　　试验材料　　外植体采集于红河州建水县关厅乡，并栽种于红河学院温室。本试验接种的外植体为马蓝的叶片、幼嫩茎段、成熟茎段，下午14：00进行取材。　　试验方法　　外植体消毒与无菌接种为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特

3、色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。　　取外植体叶片、幼嫩茎段、成熟茎段，用自来水冲洗30min，接着用洗涤剂浸洗，并用自来水流冲洗干净，将叶片剪成2～3cm2，茎段剪成3～5cm；之后于超菌台上用70%乙醇消毒10～30s，用%HgCl2处理7～10min，再用无菌水冲洗5～8次，用无菌滤纸吸干水分后，把叶片切成、茎段切成1

4、cm左右大小，无菌接种于不同培养基上。每瓶接种3个外植体，所有试验处理均进行3次重复，每次重复10瓶。试验培养基均附加蔗糖%，琼脂%，pH为。　　培养基配方筛选　　选择长势好、颜色深绿的马蓝叶片为外植体，利用正交设计试验，选用L16正交设计表安排马蓝愈伤组织诱导的试验方案。　　2结果与分析　　不同取材部位对愈伤组织诱导的影响　　以MS+・L-1+・L-1为基本培养基，3种外植体叶片、幼嫩茎段、成熟茎段在同等处理、培养条件下进行愈伤组织诱导，3种外植体都可以在MS+・L-1+・L-1培养基上诱导出愈伤组织，叶片诱导效果最佳，且诱导时间最短，接种8d便长

5、出愈伤组织，此时诱导率为%，20d后诱导率趋于稳定，为%，是较理想的组培外植体。　　培养基配方筛选　　进行马蓝愈伤组织诱导的培养基配方筛选，利用正交设计方法，以6-BA、2，4-D、NAA、IBA为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维

6、护。4个激素因素的不同配比作处理，正交设计的试验方案与试验结果见表1。　　3结语　　马蓝的叶片更有利于愈伤组织诱导，是较理想的组织培养外植体。马蓝叶片愈伤组织诱导较理想的培养基配方为MS+・L-1+2，・L-1+・L-1　　+mg・L-1+蔗糖%+琼脂%。为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。