准东油田萘降解菌群培养及菌群双加氧酶基因多态性分析

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1、为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。准东油田萘降解菌群培养及菌群双加氧酶基因多态性分析摘要：采用无机盐培养基，以萘为惟一的碳源物质�ψ级�油田石油污染土壤中的萘降解菌进行液体富集培养。经过5次培养后，利用固体平板对获得菌群萘降解能力进行检测，同时利用HPLC对降解产物进行检测。离心收集富集培养基中的菌体，提取基因组DNA，基于IlluminaMiseq测序平台对16SrRNA序列进行测序及生物信息学分析，同时采用萘双加酶基因通用引物对萘双

2、加氧酶基因片段进行扩增、测序及分析。结果表明，含有萘的固体平板有清晰透明斑的出现；高效液相检测结果显示，萘被降解成小分子产物，证明液体培养基可富集培养获得萘降解菌群。萘降解菌群16SrRNA测序比对结果显示，富集培养获得菌群分属于5门9纲15目24科31属，共33种细菌。另外共获得萘双加氧酶基因片段11条，GenBank注册号为KY-KY。系统发育树结果显示，所获萘双加氧酶基因分为4个类群。通过HPLC及双加氧酶基因的分子检测，验证已从准东油田石油污染土壤当中富集培养获得萘降解菌群。关键词：萘降解菌；高效液相色谱；细菌菌群；萘双加氧酶基因；淮东油田中图分类号：文献标识码：A文章

3、编号：0439--3726-05DOI：/为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。Abstract：Accordingtotheliterature，liquidenrichmentmediumsupplementedwithnaphthaleneasthes

4、olecarbonwasusedtoculturethenaphthalenedegradingmicrobialconsortiafromthecontaminatedsoilinXinjiangZhundongoilfield.After5repeatedcultivation，thedegradationabilityofmicrobialconsortiawasdetectedbytheclaritycirclemethodonplate，andthedegradationproductsweredetectedbyHPLC.Inaddition，theenriched

5、microbialconsortiawerecollectedbycentrifugation.ThegenomicDNAwereisolatedfromthemicrobialconsortiaandthe16SrRNAgenewasamplifiedandsequencedbasedonIlluminaMiseqsequencingplatform.Besides，thethenaphthalenedioxygenasegeneswereamplifiedwithuniversalprimersforsequencingandbioinformaticsanalysisin

6、g.The16SrRNAsequencingresultsshowedthattheenrichedmicrobialconsortiaweredividedinto5phyla，9classes，15orders，24families，31generaand33species.Inaddition，atotalof11naphthalenedioxygenasegenesegmentswereobtainedandGenBankaccessionnumberswereKY-KY，whichcouldbedividedinto4clustersbyphylogeneticana

7、lysis.为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。ThroughtheHPLCandnaphthalenedioxygenasegenemoleculardetectio