发酵工艺染菌综合分析及防止措施

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1、发酵工艺：染菌（bacteriainfection）综合分析及防止措施原创-07-O^arrowoi^e1.造成发酵染菌的可能途径有哪些？菌种培养过程操作不当培养基灭蘭不彻底发酵设备（如发酵罐、管道）密封不严空气除萌不净2.既然染菌不可避免，哪我们应该怎样做？要提高生产技术水平，强化生产过程的管理，把握好各个易染歯的环节，尽可能防止发酵染歯的发生：而且一旦发生染菌，要能尽快找出艿污染的原因，并采取相应的有效措施，把发酵染蘭造成的损失降低到最小、3.不同发酵过程相对危害熳大的杂菌种类？青禕素的发酵细短产气杆菌链霉素的发酵细短杆菌、假单孢杆菌网环素的发酵双球阐、芽孢杆菌、荚膜杆菌谷氨酸

2、的发酵噬萌体柠檬酸的发酵青霉萌4.不同生产阶段染菌对发酵的影响：种子培养期染歯:对整个发酵过程的危害极大发酵前期染菌：严®干扰生产菌的生长繁殖发酵中期染萌：干扰生产萌的代谢，影响产物的生成发酵后期染菌：影响相对较小5.不同染菌原因对发酵的影响：种子带菌：将导致染歯范围不断扩大，使生产蒙受熏大损失。空气带菌：使发酵大面积染蘭培养基或设备灭菌不彻底：一般不具延续性，使单个（批）发酵罐发酵失败设备渗漏：染菌几率较大6.发酵异常现象及染菌原因分析：（1）溶解氧的异常变化当杂菌是好气性微生物时，溶解氧的变化是在较短时间内下降，直至接近于零，且在长时间内不能回升；当杂菌足非好气性微生物，而生产

3、菌由于受污染而抑制生长，使耗氧量减少，溶解氧升高。（2）排气的CO2异常变化如杂菌污染时，糖耗加快，C02含莆含莆增加，噬蘭体污染后，糖耗减慢，C02含莆减少。因此，可根据C02含景的异常变化判断染萌，（3）其它异常现象：如菌体生长不良、pH值的异常变化、发酵过程中泡沫的异常增多、发酵液的颜色异常变化、代谢产物含量的异常下跌、发酵周期的异常拖长、发酵液的粘度异常增加等判断染菌。7.染菌原因分析：（1）从染菌的规模来分析染菌原因大批发酵罐染菌：空气系统部分发酵罐（或罐组）染菌：前期可能足种子带杂歯，或灭歯不彻底，中后期则可能足中间补料系统或油管路系统发生问题所造成的个别发酵罐连续染菌

4、：设备问题（如阀门的渗漏或罐体腐蚀膺损），设备的腐蚀磨损所引起的染傳会出现每批发酵的染菌时间向前推移的现象个别发酵罐偶然染菌：原因比较复杂，冈为各种染菌途径都可能引起。（2）从染菌的时间來分析发酵早期染歯：种子带歯、培养基和设备灭歯不彻底、设备或筲道冇死角中、后期染菌：中间补料、没备渗漏、操作不合理（3）从染菌的类型來分析：耐热性芽孢杆菌：死角或灭菌不彻底球菌、酵母：可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的浅绿色菌落（革兰氏阴性杆菌）：发酵罐的冷却管或夹套渗漏

5、霉菌：灭菌不彻底或无菌操作不严格①设备渗漏的原因：当设备渗漏吋，往往每批染谰发生的吋间逐渐提前a发酵液屮腐蚀性物质对设备的腐蚀b

6、磨蚀c设备加工不良②盘管渗漏的防止：放罐后要认真清洗发酵罐控制冷却水质景，降低其屮氯离子含a对盌管定期检査、试漏，及时发现漏隙试漏方法：气压试验水压试验③空气分布管渗漏的防止④罐体渗漏的防止⑤管件的渗漏（4）管路的连接：螺纹连接法兰连接焊接（5）空气过滤系统方而原因：原因分析：进风口、生产环境、空气过滤器染菌特点：空气过滤系统带菌会使发酵罐批批染菌、罐罐染菌，此时就要对空气过滤系统进行无菌样检测1.染菌的检查和判断无菌试验方法①显微镜检查法（镜检法）②肉汤培养法③T•板划线培养或斜面培养捡齊法④发酵过程的异常现象观察法如果肉汤连续三次发生变色反应（由红色变力黄色）或产生混浊，或平板

7、培养连续三次发现冇异常落的出现，即可判断力染歯。2.杂菌污染的挽救及处理：（1）种子培养期染菌：应经灭菌后弃之，并对种子罐、管道等进行仔细检查和彻底灭菌（2）发酵前期染菌：昔养成分消耗不多，应迅速重新灭菌：另处，补充必要的营养成分，熏新接种进行发酵。（3）发酵中、后期染歯：可以加人适当的杀菌剂或抗生素以及正常的发酵液，以抑制杂歯的生.长速度；产品的含量若达一定值，只要明确是染菌也可放罐。（4）发酵后对设备的处理：空罐加热灭朔后至120'C以上、30min后，才能使用。也可用甲醛熏蒸或甲醛溶液浸泡12h以上等方法进行处理1.杂菌污染的途径和防治：（1）种子带菌及其防治：原因分析：种子

8、保存种子培养设备种子换代及接种种子培养基防治措施：检查发生污染所用的保藏茼种。检查发生污染的种子罐接种所用的三角瓶等器皿。检齊对三角瓶、棉花塞、培养基等所进行的灭歯操作，检齊天菌锅的工作情况，校核温度表和压力表。火菌锅工作吋锅lAl空气务必排尽，检查无蘭室的无萌状况，特别是接种箱。检查接种箱所用的杀阐熏剂。检查操作人员的操作技术。对杂菌或噬菌体进行微生物检验。（2）空气带菌及其防治：防治措施：汕渗入空气：改用无油润的压缩机。列管式冷却器穿孔。过滤介质松动，空气走短路。