榨菜低盐腌制体系中优势种群的分子鉴定及分析【毕业论文】

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1、（20届）搾菜低盐腌制体系中优势种群的分子鉴定及分析中英文摘要弓IW11材料与方法11.1实验材料11.1.1原料和培养基11.1.2主要试剂和仪器11.2实验方法21.2.1榨菜腌制的生产工艺流程21.2.2搾菜腌制生产的操作要点21.2.3腌制过程中榨菜体系中的乳酸菌数和酸度的检测-21.2.416SrDNA序列检测技术构建基因文库22结果与分析32.1腌制过程中榨菜体系中不同时期的总乳酸菌数以及腌制液pH的测定-32.2不同腌制时期腌制液样品总DNA的提取及其PCR扩增结果42.3榨菜腌制体系巾细菌16SrDNA的PCR扩增结果52.4榨菜腌制体系中细菌16

2、SrDNA基因克隆文库的构建52.5榨菜腌制体系屮优势种群样品16SrDNA系统发育分析63组仑8至文谢9飼魏10P付M11摘要：采用分子生物学上构建16SrDNA兑隆文库的方法对5%盐度榨菜腌制体系中的不M腌制时期的优势种群进行了多样性分析，为揭示榨菜低盐腌制体系中优势种群的分子类型和榨菜腌制风味之间的关系奠定基础，本研究在不M吋期随机各检测了40个克隆子序列，结果表明，整个腌制体系屮的优势种群为乳酸菌。主要分为3个诚：乳杆菌属（LwZ必⑻/7仏5）、明串珠尚‘属（/心⑺卯伽e）和魏斯氏尚婶VV冷记//♦并且，各个腌制时期的蘭落组成差异较大。在腌制屮前期，主要的

3、优势种群足清酒乳杆蘭（Lactobacillus从如/）。到丫腌制后期，起主好作川的种群变成丫捎物乳杆菌（Luctobacilluxp/a/!tan⑺1）。关键词：榨菜低盐腌制；16SrDNA克降文库；优势种群；系统发育分析Abstract:Thedominantspecies’diversityof5%lowsaltpickledmustardtuberprocessingwasstudiedbytheconstructionof16SrDNAclonelibraryindifferentphases,whicewererevealedthemoleculart

4、ypeofdominantspeciesinlowsaltpickledmustardtuberprocessing,andlaidthefoundationfortherelationshipabouttheflavorofthepickledmustardtuber.40cloneswererandomlyselectedfromthelibraryinthedifferentphascs.Thcresultsindicatedthatthedominantspecieswaslacticacidbacteriaduringtheprocessing,andc

5、ouldbedividedintothreegenuses:Luctvbucillus，Leuconost()candWeisseIla.inadditionjhedifferencesofbacteriacompositionswarelargeindifferentphases.Intheprophaseandinterim,thedominantspecieswasLactobacilluswhileinthelaterperiod,thedominantspecieswa5Lactobacillusplantarum.Keywords:lowsaltpic

6、kledmustardtuberprocessing;16SrDNAclonelibrary;dominantspecies;phylogeneticanalysis引言蔬菜的腌制加工，在我国已有悠久的历史。在我国的秦朝以前，我们的祖先们就已经开始了制作肉酱、酸菜、泡菜和腌菜了。在《礼记•内则》中，就有了用盐腌制牛肉、葱和姜的记载m。勤劳聪慧的劳动人民在长期的生产实践中积累了丰富的经验。榨菜在我国的种植面积广，产量高，是主要的腌制加工蔬菜和世界三大酱腌菜之一，其屮富含有维生素C，铁、磷等矿物质和氨基酸、蛋白质等［2］。传统的榨菜腌制工艺均采用高盐进行腌制。如此一来

7、，腌制得到的成品菜盐度很高。然而，医学研宂成果表明，食用过多的食盐易导致高血压，并且对人体的某些器官会造成永久性的损坏。所以，我国人民对高盐腌制食品也越来越排斥，取而代之的低盐腌制榨菜产品正在占领市场13］。榨菜腌制过程屮，含有丰富的微生物体系，并且在不同的时期，微生物种群体系也在发生着变化［4］。其中乳酸菌种对榨菜的腌制贡献颇大［5］。随着分子生物学技术的发展，食品微生物的分子生物学研究进入了一个新阶段，人们对于微生物在分子和基因水平的认识不断深入。近年来，单链构象多态性检测（SSCP）技术方法已经广泛的应用到环境和食品（包括腌制榨菜）微生物的研宄屮［6］。SS

8、CP方法是