成都中医药大学学生科研实践创新课题结题表存档

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1、编号••成都中医药大学学生科研实践创新课题结题表课题名称逍遥散抗抑郁作用的BDNF/ras/CREB机制研究立项批准号课题类别所在单位课题负责人填表円期2011年3月31H一、基本情况性别民族出生年月负责人主要参加人贝专业年级承担任务药学学号联系方式立项调查，实验设计、造模，数理统计，论文撰写，组织人员性别出牛.年月专业年级承担任务课题名称逍遥散抗抑郁作用的BDNF/ras/CREB机制研究最终成果名称抑郁症与脑源性神经营养因子实拨经费1000经费支出13100原计划完成时间2011年3月实际完成时间2011

2、年3月鉴定时间年月原计划成果形式论文现成果形式论文成果字数5588结题种类AA.正常B.提前C.延期该成果发表、转摘情况暂无课题负责人及主要参加人员简况二、课题成果简介主要内容与要求提示(可加附页)：1.“课题成果简介”是结项的必需材料，用作成果的宣传、推广。2.主要内容包括：该课题的研究目的和意义；研究成果的主要内容、重要观点或对策建议；成果的学术价值、实践意义和社会影响，研宂成果及研宂方法有何特色、有何突破、有何建树。3.木栏目由课题负责人撰写，500-1500字。课题成果如已发表，请注明刊物名、期数和发

3、表吋间。本课题阐明经典名方逍遥散抗抑郁作用的CREB-BDNF信号通路机制，有利于指导该方临床应用及肝郁证的现代实质研宄，有利于病证结合动物模型的建立与评价。对揭示BDNF通路在肝郁证及中药疏肝解郁治法中的作用，以及新型抗抑郁药物的发现提供扎实的实验依据，具有学术指导价值和意义。屮药复方逍遥散出自《太平惠民和剂局方》，功用疏肝解郁、健脾养血，常用于肝郁血虚脾弱证的治疗。现代药理研宂与临床应用均证实逍遥散具有良好的抗抑郁作用，但其分子机制尚未阐明。本课题在传统中医药理论指导下，运用慢性温和不可预知应激结合孤养抑

4、郁模型和自主活动实验确证逍遥散的抗抑郁作用；运用Morris水迷宫观察逍遥散对正常小鼠、抑郁模型小鼠认知功能的影响•，运用实时荧光定量PCR及Western-blot测定逍遥散对CUMS模型小鼠脑内海马与皮质部位BDNF、TrkB及CREBmRNA和蛋白水平表达的影响。实验结果表明：1.逍遥散具有抗抑郁作用。(1)逍遥散30g*kg'20g•kg_1连续药4周，能显著提高CUMS模型小鼠糖水消耗量，同时自主活动测定中减少其不动时间。并对模型动物体重的减轻有对抗作用。(2)逍遥散在有效剂量下减少CUMS模型小鼠

5、不动时间。2.逍遥散具有一定改善学习记忆能力的作用，辅助于其抗抑郁作用，作用机制可能与影响单胺类递质及抗氧化、改善脑内血液循环有关。可显著改善CUMS模型小鼠的空间学习记忆能力障碍，以30g•kg1为佳。3.影响BDXF信号通路可能是逍遥散抗抑郁作用的主要机制之一。(1)逍遥散连续治疗给药4周，能明显提高⑶MS模型小鼠海马部位BDNF、TrkBmRXA的表达，对CREBmRXA的表达影响不明显。(2)逍遥散连续治疗给药4周，能提高⑶MS模型小鼠海马部位BDNF及其受体TrkB蛋白水平的表达，对CREB蛋白表达

6、无影响。综上，逍遥散具有良好的抗抑郁作用，其机制可能与提高脑内海马部位BDNF/TrkB信号通路活性有关。此外，逍遥散对学习记忆的改善作用辅助于其抗抑郁作用。课题负责人签名：年月日三、总结报告主要内容提示、成果内容以及主研方法有何特色、有何突破、有何学术价值和应用价值;有何不足和问题；有何问题尚需深入研究。1实验材料1.1动物ICR小鼠，雄性，体重18-22g，卩4川省医学科学院实验动物研究所提供，格证号：scxk(川)2008-24。1.2药液1.2.1逍遥散水提液制备购买药材，经成都中医药大学中药标本中心

7、卢先明教授鉴定后，按照柴胡9g、当归9g、白苟9g、白术9g、茯等9g、甘草4.5g、薄荷1.5g，生姜9g的比例取适釐药材，加8倍S:水浸抱30min,加热煮沸，文火煎煮lh,趁热滤过；再加6倍量水，同法煎煮分别40min及30min;合并三次滤液，文火浓缩至含生药药液4nC冰箱保存备用。煎剂经髙效液相色谱法(参照中华人民共和国药典2005版第564页方法)对其中的芍药苷进行定ft分析。2实验内容2.1逍遥散对慢性不可预知应激模型小鼠的影响(1)慢性不可预知应激小鼠模型的建立(2)慢性不可预知应激小鼠模型的

8、评价及逍遥散对其影响2.2逍遥散对BDXE-CREB通路的影响(1)逍遥散对行为绝望模型的影响及PD184161(MEK抑制剂)对其的干预作用(2)逍遥散对CUMS模型小鼠脑内BDNF、TrkB和CREB基因表达的影响(3)逍遥散对CUMS模型小鼠脑㈧BDNF、TrkB和CREB蛋白表达的影响3实验方法3.1逍遥散对慢性不可预知应激模型小鼠的影响3.1.1模型建立及给药取健康雄性小鼠适应性饲养7天，