一株盐单胞菌的分离及16srdna基因序列分析鉴定

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1、一株榆林盐碱土壤嗜盐菌的分离及鉴定*孙晓宇陈锐李切路鹏鹏门欣韩丽萍黄继红沈卫荣杯(陕西省微生物研究所微生物资源屮心四安710043)摘要H的：从陕西定边盐湖高渗极端环境中筛选分离获得嗜盐微牛•物，并对筛选获得的微生物进行种屈鉴定。方法：通过高盐选择性培养基平板分离法，从陕西定边盐湖土壤样品中，分离筛选获得极端嗜盐菌株，该菌最适生长温度35C,最适pH8.0o通过传统的表型特征(包括形态学观察、生长因子实验、生理生化特征)和系统发育学16SrDNA序列分析鉴定嗜盐菌株的分类学地位。结果：获得一株最适生长盐浓度在10%〜2

2、0%的细菌菌株A426,初步鉴定其为盐单胞^[(Halomonadaceae)盐单胞菌属(Halomonas)菌株。结论：成功获得定边盐湖地区中度嗜盐菌株A426o关键词:嗜盐菌，极端微生物，盐单•胞菌，鉴定Isolationand16SrDNAGeneSequenceAnalysisofaHalomonassp.strain"CHENRuiLIYueSUNXiao-YuLUPeng-PengMENXinHANLi-PingSHENJianHUANGJi-HongSHENWei-Rong44(Shaanxiprovin

3、ceinstituteofmicrobiology,xi?an,710043)[Abstract]Objective:IsolatehalophilicbacteriastrainfromDingBiansaltlakesample.Methods:ByhighsaltselectedculturemethodandgradientdilutionisolationmethodisolateahalophilicbacteriastrainfromtheDingBiansaltlakesample.Accordingt

4、otheclassicphenotypiccharacteristicswhichincludemorphologicalobservation,growthfactorandthephysiologicalandbio-chemicalcharacteristics,moderatehalophilestrainA426wastobeidentified・Todeterminethetaxonomypositionofthenewlyisolatedmoderatehalophilebacteriuminevolut

5、ionhistory,16SrRNAsequencehomologousalignmentwereperformedbetweenitandrelatedspecies.Results:ThestrainA426whichcangrowoptimallyinculturemediathatcontain10%〜20%NaCl.ThemoderatehalophilestrainA426wasidentifiedtobelongtoHalomonas^.Conclusion:Successfullyisolateamod

6、eratehalophilestrainA426fromDingBiansaltlake・Keywords:HalophilicBacteria,Extrememicroorganism,Halomonassp.、Identify嗜盐菌是指能在高浓度盐环境下正常住长的微牛物，其广泛分布于盐湖、盐场和海洋等富盐极端环境。根据其对盐的嗜耐程度，可分为弱嗜盐菌、中等嗜盐菌、极端嗜盐菌和耐盐菌⑴。嗜盐菌种类繁多，它们的分类主要通过表型特征、生理生化分类方法和分子生物学分类鉴定方法进行鉴定⑵。陕北定边盐湖位于黄土高原与内蒙古鄂尔

7、多斯荒漠草原过渡地带,面积约160hm2,其屮花马池为定边盐湖群屮面积最人的盐湖，开湖2000余年，湖盆面积6.78hm2,水域0.63hn?。盐湖周围为风沙滩地貌，与毛乌索沙漠西南部接壤，为典型极端环境[現木文从陕北定边盐湖农业土壤样木中分离获得一株嗜盐单胞菌，并通过16SrDNA序列的测定，对其进行了种属发育进行了鉴定。1材料1.1采样*基金项小陕两省科技厅农业创新项口(2012NKC02-14),陕西省科学院直大项口(2014k-35-2)作者：孙晓宇(1982-)男陕西咸阳助理研究员微生物分类学材通讯作者：沈卫

8、荣(1954-)男上海、研究员微生物资源及发酵工程联系邮箱：7hurong2006@126・comshonweiron^@21cn.com采样按照一•般土壤样站采集方式进行，采样位置北纬：37°4r；东经:107°3r；海拔:1307m。取地表5〜15cm深度采样，装入无菌样品袋密封，实验室4°C保存。1.2试剂NaCl,Tris