维胃方对实验性大鼠胃溃疡治疗机理的研究论文

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1、维胃方对实验性大鼠胃溃疡治疗机理的研究论文苏尚贤刘晓伟张晓洁刘剑文杨真晖【摘要】目的:通过乙酸致大鼠胃溃疡模型,研究维胃方防治慢性胃溃疡机理。方法:制备乙酸致大鼠胃溃疡模型,观察维胃方对该模型治疗后胃大体标本和胃溃疡周围胃液pH值、溃疡面积、病理组织切片;采用放射免疫法测定大鼠血清中的胃泌素。结果:服用雷尼替丁和维胃方后,从胃黏膜大体观察及切片观察,实验性溃疡大鼠胃黏膜愈合情况良好,用药组溃疡面积明显小于自愈组(P0.05),说明药物能够有效促进溃疡面的愈合;其中维胃方中剂量组溃疡面积小于雷尼替丁(P0.05)。维胃方各剂量组的pH值呈剂量依

2、赖的正相关趋势。与自愈组及模型组比较,维胃方各组血清GAS含量呈升高的趋势.freelL、0.75g/mL、1.5g/mL(以临床用药剂量按体表面积转换成动物等效剂量,低、中、高3种剂量分别为临床剂量的1/2倍、1倍、2倍),高压灭菌,4℃冰箱保存备用。②雷尼替丁水悬液:每粒150mg,山西太原药业有限公司(批号:060501),用蒸馏水将雷尼替丁配制成水悬液,含生药3mg/mL。1.1.3试剂与仪器促胃液素(GAS)放射免疫试剂盒:北京北方生物技术研究所,批号:061020BECKMAN控温高速离心机,LeicaRM2135切片机,Olym

3、pus光学显微镜,上海日环厂SN695B型放射免疫γ计数器。1.2方法1.2.1模型制作乙酸胃溃疡模型:参照Takagi等1乙酸致大鼠胃溃疡造模方法,并加以改造。大鼠造模前24h,禁食不禁水。大鼠经腹腔注射10%水合氯醛1mL深度麻醉。腹部剃毛、消毒,于剑突下腹中线打开腹腔,手术切口长约2cm,暴露出胃,在胃前壁浆膜面窦体交界处同一部分(避开血管)用浸有100%乙酸,直径为5mm的圆形滤纸接触2次,每次30s。然后还纳胃体,逐层缝合切口,保护切口。1.2.2动物分组及血清、血浆制备根据完全随机法分为7组,每组8只:A正常组,自由饮水,进食;B

4、模型组,乙酸致大鼠胃溃疡,自由饮水,进食;C自愈组,乙酸致大鼠胃溃疡,自由饮水,进食;D雷尼替丁组,乙酸致大鼠胃溃疡,第4天开始灌胃雷尼替丁水悬液2mL,共7d,每日1次;E维胃方各剂量组(E1维胃方低剂量组、E2维胃方中剂量组、E3维胃方高剂量组),乙酸致大鼠胃溃疡,第4天分别灌胃低、中、高剂量维胃方2mL,共7d,每日1次。除模型组在第4天,其余各组均在第11天麻醉后取材。大鼠经腹腔注射10%水合氯醛0.035mg/kg,深度麻醉,仰卧位四肢固定,皮肤常规消毒,在剑突下偏左剪开腹腔,暴露胃部。分离腹主动脉,用头皮针采血,用普通负压管接取血

5、液3~4mL,3000r/min离心20min,分离血清-20℃冻存备用。1.2.3观察指标胃的大体观察、胃液pH值、溃疡面积、病理切片观察、血清胃泌素。由鼠胃贲门滴取少量胃液于pH试纸,测定pH值。向胃内注入10%中性福尔马林溶液10mL,固定30min后沿胃大弯剪开,展平,观察胃黏膜大体标本。溃疡面积检测:测量溃疡的长径(DL)和短径(DS),计算溃疡的面积,按公式S=1/4×DL×DS×π,π取3.14。病理切片观察:取部分胃溃疡周围腺组织常规脱水、石蜡包埋、切片、苏木精-伊红染色作病理组织学检查。测定血清胃泌素:放射免疫。1.3统计学

6、分析采用SPSS10.0软件分析处理,数据以x±s表示,采用F检验。2结果2.1胃的大体标本观察①正常对照组:胃黏膜光整完好。②手术模型组:溃疡病灶溃疡表现明显,部分溃疡穿孔。③手术对照组:愈合不良,仍可见明显溃疡面。④雷尼替丁组:溃疡愈合较好,部分可见溃疡面,少量可见炎性渗出物,部分溃疡已完全愈合,但该组织较粗糙,颜色较周围正常组织白。⑤维胃方:低剂量和高剂量组:低剂量组大部分可以找到溃疡面,但面积较小,部分可见充血点及炎性渗出物,个别已愈合。高剂量组愈合效果较雷尼替丁好。大部分胃黏膜愈合接近,有个别愈合不良。中剂量组:绝大部分愈合良好,仅

7、见个别小溃疡。2.2光学显微镜下观察(40倍)①正常动物组:胃溃疡周围组织各层光整完好。②手术模型组:部分黏膜中断,溃疡可深及肌层,溃疡表面覆盖炎症细胞,肌层变薄,甚至断裂,纤维蛋白坏死,浆膜层部分断裂。③手术对照组:部分黏膜中断,达及黏膜肌层,黏膜下层炎症细胞浸润,部分小动脉血管内皮肿胀、增生,可见血栓,肌层变薄部分断裂,部分浆膜断裂。④雷尼替丁组:少量黏膜中断,达及腺体区,面积较小,黏膜下层炎症浸润,部分小动脉血管内皮肿胀、增生,可见血栓,肌层变薄,小部分浆膜断裂。⑤维胃方组:低剂量组与高剂量组:2组与雷尼替丁组差别不大;中剂量组:黏膜基

8、本完整,黏膜下层仅见少量炎症细胞浸润。肌层变薄。肉芽组织增生,排列较整齐,小部分浆膜断裂。2.3维胃方对实验性胃溃疡大鼠溃疡面积的影响结果见表1。2.4维胃方对实验

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