左卡尼汀补充对早产儿血浆游离肉碱影响及其意义

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1、左卡尼汀补充对早产儿血浆游离肉碱影响及其意义［基金项目］广东省科技厅社会发展领域科技计划项目(批准号：2013B021800030)［作者单位］523905东莞市东莞市第五人民医院新生儿科(王德胜，冯丽燕，陈燕梅，陈自励)；510655广州市中山大学附属第六医院(郝虎)［通讯作者］王德胜［摘要】目的:探讨早产儿左卡尼汀补充对血浆游离肉碱(freecarnitine,FC)水平影响，以期为早产儿左卡尼汀补充治疗提供一个参考指标。方法：选取2014年7月至2015年12月在东莞市第五人民医院新生儿科生后2天、5天补充左卡尼汀(10mg/(kg.d))的99例早产儿为研究对

2、象，同时选取同期无左卡尼汀补充的65足月儿作为对照，于生后1天、3天和7天采集足跟末梢血，用串联质谱技术测定FC,分析早产儿早期血浆FC随日龄变化特征。结果：无左卡尼汀补充的足月儿血浆FC水平呈逐渐降低趋势，差异具有统计学意义；与足月儿相比，早期早产儿血浆FC保持在出生时的水平。同时研宄还发现，出生当天早产儿血浆FC较足月儿高，差异具有统计学意义。结论：早产儿通过合理的补充左卡尼汀，能够使其血浆游离肉碱维持在出生时的水平，从而为早产儿脂肪酸代谢顺利进行提供保障。［关键词】左卡尼汀；游离肉碱；早产儿；串联质谱技术随着新生儿科医疗技术水平的飞速发展，早产儿的存活率明显升高

3、；同时有其导致的近、远期并发症也越来越受到新生儿科医生的关注。其中肉碱(carnitine)，又称左旋肉碱或左卡尼汀，在体内以游离肉碱(freecarnitine,FC)和酰基肉碱(totalacylcarnitines,AC)两种形式存在，除了在心肌、骨骼肌的发育中发挥重要作用外，在神经系统的发育中也起到了关键性作用［1］。然而，早产儿木身合成肉碱能力不足，出生后肉碱补充乂没有列入常规营养支持，因此极易造成FC的缺乏，从而导致肌张力下降、非酮症性低血糖、心肌病、脑病和反复的感染。因此，早产儿出生后，特别是生后早期血中FC能否维持在冋期宫内的水平，0前报道相对较少。本

4、研究通过检测早产儿生后早期补充左卡尼汀后血中FC水平，以期为早产儿左卡尼汀补充治疗提供一个参考指标。资料与方法研宄对象与分组选择2014年7月〜2015年12月在东莞市第五人民医院新生儿科生后2天、5天补充左卡尼汀(10mg/(kg.d))的99例早产儿为为研究对象，并选择同期无左卡尼汀补充的65足月儿作为对照，于生后1天、3天和7天采集足跟末梢血，同吋记录其性别、年龄、胎龄和出生体重。根据标本采集吋间点进行分组，标本基本临床资料和分组见表1。本研究获得受试新生儿家属的知情同意和东莞市第五人民医院伦理委员会的批准。标本采集空腹状态下，采集足跟末梢血于血斑采集卡(美国W

5、hatman903号滤纸)上，形成一个直径lcm、滤纸两面完全浸透的均匀血斑，室温条件下，平放自然晾干后，于4°C冰箱保存备用。仪器和试剂3200QTRAP高效液相色谱串联质谱联用仪(AppliedBiosysterms,美国)，配套设备和分析软件分别为电喷雾化离子源(electrosprayionization,ESI)和ChemoView1.4.2；美国Agilent1100型高效液相色谱仪。所选试剂纯度均为高效液相色谱级别，包括甲醇、正丁醇、乙酰氯、乙腈和保护氮气。串联质谱条件选用色谱柱为瑞典KromasilC18(50mm×4.6mm×

6、5μm)，采用80%乙腈水溶液为流动相，四元泉流速为lml/min，进样量20μl/次。采用母离子扫描方式，子离子m/z85片，母离子扫描范围m/z210〜502。数据处理和统计分析ABI数据分析软件ChemoView1.4.2对质谱数据处理，根据各丁酯化脂酰肉碱及其同位素内标的离子峰强度，由内标水平，自动计算所测样品脂酰肉碱水平。应用SPSS19.0对数据进行统计分析：数据采用均数±标准差(?x±s)和95%置信区间(95%confidenceinterval,95%Cl)表示，运用Shapiro-Wilk进行正态性检验，然后

7、采用单因素方差分析或独立样本t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。结果2.1早产儿与足月儿血中FC标水平与tl龄关系分析早产儿与足月儿组在不同日龄血浆FC水平(μM)的均数±准差(?x±s)和95%置信区间(95%Cl)见表2。数据经Shapiro-Wilk检验显示正态分布，然后进行单因素方差分析，结果显示：早产儿组血中FC水平在不同日龄差异无统计学意义(F=0.478,P=0.621〉0.05),足月儿组随日龄增加FC水平呈逐步减少趋势，差异具有统计学意义(F=9.575,P=0.000<0.001)见图1A,