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1、蔬菜农药残留快速检测的影响因素及解决措施摘要着重讨论了有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留问题以及蔬菜中农药残留快速检测技术的方法原理,分析了不同检测环节在检测过程中易出现的问题,并针对这些问题提出相应的解决措施,以减少误差,提高检测结果的准确性。 关键词蔬菜农药残留快速检测;原理;影响因素;解决措施 农药是把“双刃剑”,对促进农业增产有极其重要的作用。但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当,导致农产品农药残留严重超标,严重危害到广大人民群众的身体健康。因此,加强对农药残留的快速检测已成为十分必要的监管措施。 目前,常用的蔬菜农药残留快速
2、检测技术是一种生化检测法。生化检测法中又以酶抑制法应用最为广泛,该方法根据乙酰胆碱酯酶被抑制的程度(抑制率)来检测蔬菜上的有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留,用于蔬菜中的水分、碳水化合物、蛋白质、酯类等物质的检测不会对农药残留物的检测造成干扰,具有快速方便、前处理简单、成本较低等优点,适用于现场定性和半定量测定,特别适合在蔬菜生产基地、批发市场及农产品检测部门开展快速检测工作。该方法可对有农药残留的蔬菜进行粗筛,将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外,避免因农药残留发生中毒事件。蔬菜农药残留的快速检测方法适用于叶菜类、果菜类、豆菜类、根菜类(除胡萝卜、
3、茭白、韭菜、蘑菇等)中的有机磷类(如甲胺磷、氧化乐果、对硫磷、甲拌磷、久效磷等)和氨基甲酸酯类(如克百威、抗蚜威等)等农药残留的快速检测。 1蔬菜农药残留检测技术的原理 该方法是根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中的乙酰胆碱酯酶的活性造成神经传导介质乙酰胆碱的积累,影响正常传导,导致昆虫中毒致死的原理而设计[1]。如果蔬菜中不含有机磷和氨基甲酸酯类农药,乙酰胆碱酯酶水解后,水解产物可与显色剂反应产生颜色,如果蔬菜中含可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性的有机磷和氨基甲酸酯类农药,这种酶就不能被水解,从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酯酶
4、和显色剂,用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。在溶液中反应后,用分光光度计测定吸光值随时间的变化,计算出抑制率,当抑制率小于70%时为合格,以此判断蔬菜中含有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的情况。 2蔬菜农药残留快速检测中的影响因素及解决措施 该技术对生化反应条件要求严格,在检测过程中会出现各种影响因素,致使检测同一批次的蔬菜样品重现性不好,对此要采取一些相应的解决措施。 (1)检测室室内的温度影响。检测室温度在20～30℃之间时,使用改进后的酶,可以直接在室温下培养,22℃左右培养20min,25℃以上培养15min;如果室温低于20℃,必
5、须放进37～38℃培养箱中培养[2]。(2)乙酰胆碱酯酶的活性的影响。检测药品在贮藏过程中要保证药品的贮藏温度,尤其是酶试剂及底物要在0～5℃温度条件下保存,以确保乙酰胆碱酯酶的活性[3]。 (3)分光光度计调试的影响。分光光度计要经常进行较准调试,如进行调百位、调零等,以确保仪器的测试准确度。 (4)待测样品放入分光光度计速度的影响。待测样品加入底物后,应马上摇匀,放入测定仪,否则影响数据准确性。经实践,在菠菜样品测试中,立刻放入的抑制率为21.4%,1min后放入的为51.7%,可见,加试剂后放入测试仪的速度快慢可影响其准确性。 (5)比色杯的
6、透光度影响。保持比色杯的清洁,使比色杯有好的透光度是减少检测误差的必要条件。经常使用紫外分光光度计对比色杯进行检查校准,对超出范围的比色杯定期用乙醇清洗。 (6)药品配制过程中的影响。磷酸盐缓冲液的配置一定要用蒸馏水、纯净水或去离子水,不可使用矿物质水,否则在测量过程中干扰较大,影响准确性。 (7)微量移液器的影响。微量移液器要专用,贴上标签,避免交叉使用造成试剂污染;试剂从试剂瓶吸出后,不能再放回瓶中,坚持只吸不进的原则,防止试剂污染[4]。使用定量加液器的加液量的误差太大,建议使用量筒来称量提取试剂。 (8)蔬菜自身的影响。葱蒜类、香菜、韭菜、
7、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等农产品的汁液中含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。因此,处理这类样品时,可采取整株蔬菜(或大块蔬菜)浸出提取液的方法(不要搞烂样品)。对叶绿素含量较高的蔬菜,也可采取类似方法。 (9)在样品前处理过程中的影响。蔬菜样品的前处理时,摇床时间为2～3min,摇床转速在200左右为宜,若转速过多和时间过长,易将样品搞烂,使提取液中的蔬菜色素过多,影响分光光度计的测量。 3
