真菌毒素快速筛选技术培训教程

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1、食品中化学污染物和有害因素快速筛选技术简介一酶联免疫分析技术主要内容应用前景操作步骤产品及其特点原理介绍1原理介绍1.1技术基础免疫测定ELISA是一种免疫测定。免疫测定（immunoassay，IA）是应用免疫学技术测定标本的方法。在检验中主要通过抗原抗体反应检测样品中的抗原性物质。抗原抗体反应具有特异性和敏感性。1.2ELISA的原理ELISA的基础抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。待测物与固相载体表面的抗原或抗体结合。洗涤液体中的其他物质。再加入酶标记的抗原或抗体。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅

2、进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。1.3ELISA的类型直接竞争法样品溶液酶标抗原二抗抗体1.3ELISA的类型间接竞争法样品溶液抗原酶标二抗抗体2产品及其特点2.1产品概要应用范围：该产品可以快速定量的检测不同样品中的多种真菌毒素、非法添加物、抗生素等。突出特点：，适用于大量样品筛选。消耗品和仪器消耗品：一次性使用MK-3Ex型全自动酶标仪仪器采用“单键飞梭”旋钮，方便适用和设定方便、快捷、精准，行业内属世界首创可选配酶免工作站，酶免分析软件终身提供免费升级。具有振板功能，速度和时间可调；2.2产品汇总毒素类型试

3、剂盒检测限，ppb样品种类真菌毒素黄曲霉毒素B10.1玉米，大米等谷物，坚果，饲料黄曲霉毒素M10.05乳及乳制品，奶粉，奶酪玉米赤霉烯酮0.5小麦，玉米等谷物，饲料呕吐毒素10小麦，玉米等谷物，饲料赭曲霉毒素A0.1小麦，玉米等谷物，饲料非法添加物三聚氰胺2.0乳，饲料，肌肉内脏克伦特罗0.1尿液莱克多巴胺0.04尿液，肌肉，饲料沙丁胺醇0.1尿样，肌肉，肝脏，肾脏玉米赤霉醇0.05牛奶，牛肉，尿样，饲料抗生素卡那霉素1.0冻干药品磺胺二甲基嘧啶0.5肌肉，内脏，乳恩诺沙星1.0肌肉，内脏，水产，蜂蜜磺胺喹噁啉1.0乳，肌肉，内脏，蜂蜜，禽蛋4应用领域粮油企业粮食收购站工商、

4、质量监督系统饲料企业养殖厂餐饮系统干货调料企业等黄曲霉B1试剂盒操作流程（直接法）直接法基本原理1.准备工作先将保存在4℃中的试剂盒取出，使试剂盒温度回温到室温，并确保在有效期内使用。打开试剂盒，取出说明书并认真阅读2.样品处理①称取粉碎的样品5g②将5g样品倒入50mL离心管中③70%甲醇水提取液的配置④取25ml70%甲醇水倒入50ml离心管中⑤将盖子拧紧后，振荡器提取10min⑥振荡结束后，取下，用滤纸过滤即可。若检测样品为饲料样品，应使用针式滤膜（0.22μm有机系）过滤1）吸取50μL标准品或样品提取液分别加至相应的微孔（双孔）中，然后各加入50μL稀释后的酶标抗原，

5、再加入50μL稀释后的抗体，加盖，在室温温育10-30min（依据检测的毒素不同）。3.点板程序2）倒出孔中的液体，每孔加入250μL稀释好的洗涤液，置于酶标板振荡器上振荡30s钟（或者手工振荡），重复操作四次。洗完后用力在吸水纸上拍干。4、酶标板的洗涤3）每孔加入150μL显色底物，室温避光温育10min。5、显色4）每孔加入50μL终止液。6、终止7、读数MK-3Ex型全自动酶标仪8.软件的安装使用前先将软件成功安装到计算机上1）将压缩文件包解压缩2）双击图标3）输入序列码：1234569.软件的使用双击图标打开软件，进入主页面点击新建按钮，建立检测程序，如图左侧为标准品浓

6、度的设置，依次输入标准品浓度，和平行个数右侧为样品个数和样品稀释倍数设置好后点击确定，进入主页面，如下图上半部分为设置部分，需要按位置点击，点击后标准品显示为第一个标准品的平行，依次类推。样品点击后显示为下半部分为OD输入值输入后入右下图软件输入前软件输入后点击图标即可出标准曲线点击图标即可得到样品检测结果现有客户淮安CIQ、中国检科院、顺义质检所、大兴质检所、朝阳质检所、四川农科院、四川眉山质检所（蒙牛出事的地方）、内蒙古质检院、希杰饲料（全国10个分公司，南京有一个分公司）、国家粮食局质量中心、湖北粮油检测站、山东粮油检测站（全国大约20个粮油检测单位）、安徽CDC、芜湖C

7、DC等10个左右CDC单位、一些饲料企业、一些牛奶企业二胶体金免疫层析技术主要内容应用前景操作步骤产品及其特点原理介绍1原理介绍1.1技术基础快检卡的技术基础iCheck系列快检卡采用的是胶体金免疫层析快速检测技术（goldimmunochromatographyassayGICA）1957年英国化学家制备胶体金1990年Beggs建立胶体金免疫层析标记蛋白（抗体）1.2反应模式竟争抑制法此法适用于小分子抗原的检测。目前滥用药物、农药残留、体液中小分子肽的检测等采用此方法。Clover检测真