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时间:2018-12-02
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1、上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:日期:年月日上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将
2、本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密□。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名:指导教师签名:日期:年月日日期:年月日上海交通大学医学院01级英文班硕士学位论文结肠癌肿瘤干细胞的初步研究摘要目的:检测结肠癌细胞系SW-620中是否存在SP细胞(sidepopulationcells),若存在则测定其比例,使SP细胞中寻找结肠癌肿瘤干细胞成为可能;利用流式细胞仪检测结肠癌细胞系SW-620中是否存在CD13
3、3+的细胞亚群,若存在则使用免疫磁珠筛选CD133+的细胞亚群,再通过流式细胞仪检测经免疫磁珠筛选后阳性与阴性细胞之中的CD133+细胞比例的变化,探讨使用免疫磁珠筛选CD133+细胞在结肠癌肿瘤干细胞研究中的可行性。方法:本研究第一部分是在结肠癌细胞系SW-620细胞悬液加入Hoechst33342和PI,然后在对照组加入维拉帕米,然后上流式细胞仪检测SP细胞的表达,检测结肠癌细胞系SW-620中SP细胞比例。第二部分是利用流式细胞仪检测结肠癌细胞系SW-620中是否存在CD133+的细胞亚群,若存在则使用免疫磁珠筛选CD13
4、3+的细胞亚群,再通过流式细胞仪检测经免疫磁珠筛选后阳性与阴性细胞之中的CD133+细胞比例。结果:(一)结肠癌细胞系SW-620中存在SP细胞,所占比例为0.1~1.0%。(二)结肠癌细胞株SW-620中CD133+细胞所占比例为55.16%左右。经免疫磁珠筛选后,CD133阳性细胞群体中CD133+细胞所占的比例为第1页上海交通大学医学院01级英文班硕士学位论文75.60±6.89%,CD133阴性细胞群体中CD133+细胞所占的比例为33.40±3.74%。结论:(一)人结肠癌细胞系SW-620中确实有SP细胞存在,从SP
5、细胞中寻找结肠癌肿瘤干细胞的研究方法是可行的。(二)人结肠癌细胞系SW-620中确实有CD133+细胞存在,而且经过免疫磁珠筛选后CD133+细胞可以得到富集,免疫磁珠筛选CD133+细胞作为结肠癌肿瘤干细胞的研究方法是可行的。关键词:结肠癌细胞系肿瘤干细胞SP细胞流式细胞仪CD133免疫磁珠筛选第2页上海交通大学医学院01级英文班硕士学位论文PreliminarystudyoncancerstemcellsinhumancoloncancerAbstractObjective:Toinvestigatetheexistence
6、andpercentageofSPcellsinhumancoloncancercelllineSW-620.Thefeasibilityofthemethod(SPcells)toinvestigatethecancerstemcellsinhumancoloncancerwillbeexplored.ToinvestigatetheexistenceandpercentageofCD133+cellsinhumancoloncancercelllineSW-620.Theninvestigatethepercentageof
7、CD133+cellsafterthecellsscreenedwiththeMACS.Thefeasibilityofthemethod(CD133+cellsscreenedwiththeMACS)toinvestigatethecancerstemcellsinhumancoloncancerwillbeexplored.Methods:Inthefirstdepartmentoftheresearch,weaddedHoechst33342andPIinthesuspensionofhumancoloncancercel
8、llineSW-620,inthecontrastgroups,weaddedVerapamilinaddition.ThenweinvestigatedthepercentageofSPcellswithflowcytometry.Intheseconddep
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