《实验二球菌杆菌》ppt课件

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1、实验二球菌，杆菌化脓性球菌革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌N.gonorrhoeaeN.meningitidisS.pneumoniaestaphylococcusStreptococcus菌落中等大小、不透明、表面光滑、边缘整齐完全溶血、金黄色金黄色葡萄球菌不溶血、白色表皮葡萄球菌不溶血、柠檬色腐生葡萄球菌葡萄球菌鉴别菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐G+、链状完全溶血乙型溶血性链球菌不溶血丙型溶血性链球菌草绿色不完全溶血环甲型链球菌肺炎链球菌胆汁溶菌试验-（混浊）+（澄清）链球菌鉴别脓汁或喉拭子涂片、革

2、兰染色、镜检血琼脂平板观察菌落特征及溶血情况生化反应、致病力试验及药敏试验脓汁标本病原性球菌的分离鉴定由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊断为脑膜炎球菌由泌尿、生殖系统来源的标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊断为淋球菌37℃24h脓汁标本病原性球菌的分离鉴定根据菌落特点及涂片检查作出初步判断，然后：菌落中等大小、完全溶血、不透明、金黄色、G+，葡萄状排列，可能是金黄色葡萄球菌，可进一步做血浆凝固酶试验和甘露醇发酵试验，确定其致病力。菌落小、半透明、完全溶血、G+、链状，为乙型溶血性链球菌菌落小、半透明、绿色不完全溶血环，G+

3、、短链状，为甲型溶血性链球菌或肺炎链球菌，通过胆汁溶菌和菊糖发酵试验进一步鉴别。葡萄球菌血浆凝固酶试验取一个载玻片，划分3格，标记1、2、3。在格内分别滴加：1：兔血浆一滴2：兔血浆一滴3：盐水一滴以接种环挑取细菌混悬于液滴中：1：金黄色葡萄球菌2：白色葡萄球菌3：金黄色葡萄球菌立即观察结果。粪便标本肠道杆菌的分离鉴定克氏双糖铁培养基尿、靛、动培养基分析结果SS平板EMB平板挑取可疑菌落玻片凝集试验粪便SS平板－分离肠道病原菌的强选择培养基成分和作用：基础培养基：提供氮源和碳源胆盐、枸橼酸钠、煌绿：可抑制肠道非致病菌的生长，而对肠道致病菌抑制作用弱。乳糖

4、，中性红（pH6.8-8.0，红→橙黄）：致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨产生碱性物质→菌落淡黄色；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈红色病原菌:小,无色,半透明非致病菌:大,红色EMB（EosinMethylBlue)平板－分离肠道病原菌的弱选择培养基成分和作用：基础培养基：提供氮源和碳源伊红、美蓝：可抑制肠道非致病菌的生长，而对肠道致病菌抑制作用弱。乳糖，伊红、美蓝：致病菌不分解乳糖→菌落无色半透明；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈紫黑色病原菌:半透明,无色非致病菌:紫黑色克氏双糖铁培养基接种方法如何观察上层含乳糖部分乳糖发酵：致病菌红色，非致病菌黄色H2S然后

5、观察下层发酵葡萄糖（产酸产气）动力乳糖硫酸亚铁固体葡萄糖半固体指示剂:酚红乳糖葡萄糖硫化氢尿素靛基质动力大肠杆菌黄色+--++痢疾杆菌红色+--+/--伤寒杆菌红色++/---+副伤寒杆菌红色++--+变形杆菌红色++++/-+肥达试验(WidalTest)原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及甲型副伤寒、肖氏沙门菌、希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途：辅助诊断伤寒，副伤寒方法：取小试管32支，分成4排，每排8支，依次标号。于小试管内各加入0.5ml生理盐水。在每一排第1管中各加患者血清0.

6、5ml，吸打混匀，吸取0.5ml加入第2管作对倍稀释……依次稀释至第7管弃去0.5ml，第8管为对照。2~3排按同法稀释。按8.7.…1列的顺序，分别对第1排各管加入伤寒H抗原0.5ml；第2排各管加入O抗原0.5ml；同样对第3排各管加甲型副伤寒（PA）H抗原0.5ml；第4排各管加乙型副伤寒（PB）H抗原0.5ml。将各管混匀，置37℃水浴箱中16~18小时后观察结果。肥达试验结果观察根据凝集反应的强弱，分别以“++++、+++、++、+”记录：++++：液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底。+++：液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底。++：

7、液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物。+：液体较混浊，可见极少量凝集物。-：液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点（与对照管相似）。血清效价（或滴度）：能与一定量的抗原发生肉眼可见的明显凝集（即“++”凝集）的血清最高稀释倍数，称为血清的效价。血清的效价代表着血清中抗体的含量，其效价愈高，所含抗体的量愈多。如血清最低稀释倍数（1∶40）仍无凝集，则视为阴性或效价低于1∶40；如血清的最高稀释倍数（1∶1280）仍完全凝集，则示血清效价高于1∶1280。