微米大黄炭治疗胃溃疡出血作用机制的实验研究论文

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1、微米大黄炭治疗胃溃疡出血作用机制的实验研究论文时昭红，张介眉，张书，冯云霞，侯光华【摘要】【目的】探讨微米大黄炭治疗胃溃疡出血的止血作用机制。【方法】选用昆明种小鼠和SD大鼠为研究对象，随机分为空白对照组、云南白药组（剂量为9g·kg-1·d-1）和微米大黄炭高、中、低剂量组（剂量分别为8、4、2g·kg-1·d-1），灌胃给药6d后检测小鼠出、凝血时间及血小板计数；测定大鼠血小板功能及纤溶活性等指标。【结果】与空白对照组比较，微米大黄炭各剂量组均能缩短小鼠出、凝血时间（Ｐ＜００1）.freelo酶标

2、仪（上海热电仪器有限公司）；DFM96型多管放射免疫计数器（合肥众成机电技术公司）。14指标检测141凝血时间和出血时间的测定取昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分为微米大黄炭低、中、高剂量组（简称大黄炭低、中、高剂量组），云南白药组和空白对照组5组，每组12只，大黄炭低、中、高剂量组分别以2、4、8g·kg-1·d-1剂量灌胃给药，云南白药组给予云南白药，剂量为9g·kg-1·d-1，空白对照组给予等容积生理盐水。连续给药6d，1次/d。于末次给药1h后，按毛细血管法［2］测定凝血时间，以断尾法

3、［3］记录小鼠出血时间。142血小板计数的测定取昆明种小鼠60只，分组方法及给药方法同141，每组12只，于末次给药1h后摘取右侧眼球取血05mL，在全自动血小板计数仪上检测。143血小板凝集性测定取SD大鼠50只，雌雄各半，分组方法及给药方法同141，每组10只。于末次给药05h后，30mg/L戊巴比妥钠10mL/kg腹腔注射麻醉，背位固定，心脏穿刺取血18mL，按说明书要求分离富含血小板血浆（PRP）和血小板血浆（PPP），分别置于比色杯中，调整好透光度后，将诱导剂二磷酸腺苷（

4、ADP）2μmol(1μmol/mL)加入PRP中，记录浊度改变曲线及最大聚集率（pMA/%）。144TXB2、6ketoPGF1α及血小板GMP140含量测定取清洁级SD大鼠50只，雌雄各半，分组及给药方法同141，每组10只。末次给药后05h后，按002mL/kg剂量腹腔内注射20mg/L戊巴比妥钠麻醉，心脏穿刺取血2mL，用消炎痛乙二胺四乙酸二钠（EDTANa2）抗凝备检，以3000r/min离心10min，分离血浆，严格按试剂盒说明书步骤操作，采用放射免疫法测定TXB2和6k

5、etoPGF1α含量，采用酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法测定GMP140含量。145组织型纤溶酶原激活剂（tPA）及其抑制剂（PAI1）水平测定取清洁级SD大鼠50只，雌雄各半，分组及给药方法同141，每组10只。末次给药后1h，以30mg/L戊巴比妥钠10mL/kg腹腔注射麻醉，背位固定，心脏穿刺取血2mL，用EDTANa2抗凝备检，3500r/min离心15min，分离血浆，采用ELISA法检测tPA、PAI1水平。146凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血活酶时间（A

6、PTT）测定取清洁级SD大鼠50只，雌雄各半，分组及给药方法同141，每组10只。末次给药后1h,以30mg/L戊巴比妥钠10mL/kg腹腔注射麻醉，背位固定，心脏穿刺取血18mL，38mg/L枸椽酸钠（与血液容积比为1∶9）抗凝，以3000r/min离心10min分离血浆后，在全自动血凝分析仪上检测PT和APTT值。15统计学方法采用SPSS130统计软件进行统计分析。2结果21各组对小鼠出、凝血时间及血小板计数的影响表1结果显示，大黄炭高、中、低剂量组和云南白药组均能缩短小鼠出、凝血时间

7、，与空白对照组比较有显著性差异（P＜001）；与云南白药组比较，大黄炭高剂量组作用显著（P＜005）。各给药组均能显著提高小鼠血小板计数（P＜005），其中大黄炭高、中剂量组作用显著（P＜001）；与云南白药组比较，大黄炭高剂量组可显著提高小鼠血小板计数（P＜005）。22各组对大鼠血小板聚集性及TXB2、6ketoPGF1α、GMP140含量的影响表2结果显示，各给药组均能显著提高血小板最大聚集率及TXB2、GMP140含量（P＜005或P＜001），显著降低6ketoPG

8、F1α含量（P＜005或P＜001），大黄炭低、中、高剂量作用呈现一定的剂量效应关系，且大黄炭高剂量组除GMP140含量外，作用均优于云南白药组（P＜005）。23各组对大鼠PT、APTT和tPA、PIA1活性的影响表3结果显示，各给药组均可显著缩短大鼠PT、APTT（P＜001）,且大黄炭中、高剂量组缩短PT的作用优于云南白药组（P＜005），但大黄炭各剂量组对tPA及PAI1活性无显著影响（P＞005）。表1各组