胃癌组织β连环蛋白与尾侧型同源转录因子2表达的临床意义

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1、胃癌组织β连环蛋白与尾侧型同源转录因子2表达的临床意义作者：黄知果，孙维佳，何剪太，张阳德【摘要】目的：探讨胃癌β连环蛋白(βcatenin)与尾侧型同源转录因子2(CDX2)的表达与浸润、转移及预后的关系.方法：胃癌患者80例，以正常胃黏膜12例作为对照，应用SP免疫组化方法检测βcatenin和CDX2的表达.结果：正常胃黏膜上皮中βcatenin全部正常表达，而在胃癌组织中表达减弱、缺失或分布异常.CDX2则在正常胃黏膜上皮中不表达.βcatenin和CDX2的表达与胃癌组织的分化程度、肿瘤生长方式、癌

2、细胞浸润深度及淋巴结转移有关（P<0.01）.当患者βcatenin阳性表达/CDX2阳性表达时，术后5a生存率最高(P<0.05).结论：βcatenin,CDX2与胃癌的发生、浸润、转移有关.【关键词】β连环蛋白；尾侧型同源转录因子2；胃肿瘤；预后　　【Abstract】AIM:ToanalyzetheassociationoftheexpressionofβcateninandCDX2etastasis,andprognosisofhumangastriccarcinoma.METHODS:Eigh

3、typatientsaand12normalsascontrolinedfortheexpressionofβcateninandCDX2bySPimmunohistochemistry.RESULTS:βcateninalgastricmuembranousepithelium,butCDX2aliydistributedingastriccarcinomatissues.Thesetarkersetastasisofgastriccarcinoma(P<0.01).The5yearsurvivalrateayb

4、eassociatedetastasisofgastriccarcinoma.　　【Keyachneoplasms;prognosis　　0引言　　胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一.近年来的诸多研究表明多重遗传变化与胃癌的发生、发展密切相关.β连环蛋白（βcatenin）是上皮型钙黏素/连环蛋白复合物的重要成分之一，是保证上皮型钙黏素行使黏附功能所必需的蛋白质.该复合物下调将导致的黏附功能丧失，是许多上皮性恶性肿瘤浸润进展的重要步骤.有研究表明，βcatenin在乳腺癌和结肠癌中表达异常，并与癌组织的浸润和转移有关［1］，

5、但对胃癌组织的影响尚未见详细报道.尾侧型同源转录因子2(caudaltypehomeoboxtranscriptionfactor2,CDX2)是人体中肠道特异性表达的核转录因子，在肠黏膜上皮细胞的发育及保持其形态、结构特征中起着重要作用.大量研究认为CDX2在结直肠肿瘤发生过程中扮演“抑癌基因”的角色，并与肿瘤的生物学特性及患者预后密切相关［2］，而关于CDX2对胃癌发展作用和意义的研究报道不多.因此，我们采用免疫组织化学方法检测80例胃癌组织中βcatenin和CDX2的表达情况，探讨二者与胃癌发生、浸润、转移及预后

6、的关系.　　1对象和方法　　1.1对象　　200006/200206胃癌手术病理学诊断标本80(男55，女25)例；年龄53.6±10.3(32～75)岁.患者术前均未行化放疗.均被随访，时间5～60mo.分别根据国际胃癌新TNM分期标准、Lauren分类法、胃癌组织学分类标准及淋巴转移情况对病例进行分组.正常对照组标本12例，为距胃癌边缘10cm以上的胃黏膜组织，经病理学检查证实无癌肿浸润.　　1.2方法　　采用免疫组织化学染色SP法，标本经40g/L中性多聚甲醛固定,石蜡包埋，4μm连续切片，70℃烤片15min，梯度

7、乙醇脱水，30mL/LH2O2灭活内源酶，PBS漂洗5min×3次.正常羊血清室温孵育15min.滴加20～30μLPBS稀释的一抗(1∶5的HECD1mAb)4℃过夜.PBS漂洗5min×3次.二抗、三抗依次37℃孵育45min，PBS漂洗5min×3次.DAB显色5～10min，自来水充分洗涤，苏木素复染5min，稀盐酸淡化30s，冲洗5min.脱水、透明、封片，镜检.设阳性对照,用PBS替代第一抗体作阴性对照.鼠抗人βcateninmAb（工作浓度1∶50，购自美国抗体诊断公司）、鼠抗人CDX2mAb（工作浓度1∶5

8、0，购自美国抗体诊断公司）和免疫组化采用链霉菌抗生素蛋白过氧化物酶法染色(SP法)试剂盒均为SantaCruz公司生产，购自北京中山生物技术有限公司.取10个高倍视野，以阳性癌细胞占观察癌细胞总数的百分比作为阳性细胞率.细胞膜呈棕黄色颗粒染色者为βcatenin阳性细胞，