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1、P16、P53、PCNA在膀胱癌中的表达及意义居红格沈淑萍耿虹王欣欣【摘要】目的:研究P16、P53、PA在膀胱癌中表达及其意义。方法:应用免疫组化S-P法检查52例膀胱癌组织中P53、P16、PA表达水平。结果:52例膀胱移行细胞癌中P16、P53、PA阳性表达率分别为42.3%、57.6%、59.6%，P16阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为58.8%、38.5%和22.2%，P53阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为41.2%、57.7%和88.9%，PA阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为17.3%、30.8%和66.7%；随着膀胱癌病理分
2、级上升,P16表达阳性率逐渐下降,P53和PA阳性率逐渐上升。结论:P16、P53、PA的免疫组化检测具有评估膀胱癌预后的价值。【关键词】P16；P53；PA；膀胱肿瘤；免疫组织化学AbstractObjective:TostudytheexpressionandsignificanceofP16,P53andPAinbladdercarcinoma.Methods:Theimmunohisto-chemicalstainingmethoda.Results:Of52cases,P16orsorsorsmunohisto-chemecal
3、analysisofP16,P53andPAisofsomevalueinevaluatingprognosisofbladdercancer.Keya;Immunohist-chemistry膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤,早期做出正确的诊断对疾病的治疗与预后有重要的临床意义。膀胱癌生物学标记作为膀胱癌的早期诊断、监测以及预后评估的有效手段正受到越来越多的关注。单个癌基因蛋白产物或抗癌基因蛋白产物与膀胱癌发生的相关性研究已有很多报道,而对于同一膀胱癌标本多个癌基因蛋白产物或抗癌基因蛋白产物表达规律的研究报道较少。我们用免疫组化方法检测膀
4、胱癌中P16、P53、PA的表达水平,以探讨它们的表达与膀胱癌生物学行为的关系。 1材料与方法 1.1材料 包头医学院第一附属医院2003年1月至2007年1月间手术切除的膀胱移行细胞癌石蜡包埋组织块标本69例,其中男29例,女23例，年龄33～80岁,平均55.5岁。本组患者在外科手术之前均未作其他治疗。另取5例正常膀胱黏膜为对照组。全部标本均经10%福尔马林常规固定,石蜡包埋，作4μm厚连续切片,分别作HE染色和P16、P53、PA免疫组化染色。病理分级按WHO标准:Ⅰ级17例,Ⅱ级26例,Ⅲ级9例。 1.2方法 P16、P
5、53、PA免疫组化染色采用S-P法,染色步骤按说明书进行。所有试剂盒均为福州迈新生物技术有限公司产品。 1.3染色结果判定 P16、P53、PA染色阳性细胞表现为细胞核呈棕褐色,轮廓清楚。 2结果52例膀胱癌中有22例P16蛋白表达阳性（42.3%),30例P53蛋白表达阳性（57.6%),31例PA蛋白表达阳性（59.6%)。对照组膀胱组织中P16、P53和PA的表达为100.0%，0.0%，0.0%。P16蛋白在正常膀胱组织中的阳性表达率明显高于膀胱癌组织中的阳性率，两者之间差异有统计学意义（P＜0.01)。P53和PA蛋白在正
6、常膀胱组织中的阳性表达率明显低于膀胱癌组织中的阳性率，两者之间差异均有统计学意义（P＜0.01)。随着膀胱癌病理分级上升,P16表达阳性率逐渐下降,P53和PA阳性率逐渐上升。P16、P53和PA在不同级别的膀胱癌中的表达见表1。表1P16、P53和PA在不同级别的膀胱癌中的表达（略） 3讨论抑癌基因是细胞的正常基因,它们具有抑制细胞生长和肿瘤形成的功能,当一对等位抑癌基因全部丢失或失活时,细胞就可以发生恶变。P53基因位于第17号染色体的短臂上,由11个外显子和10个内含子组成,正常体细胞P53基因为编码53kD的磷酸结合核蛋白,后者
7、又称为野生型P53蛋白。野生型P53基因是抑癌基因,野生型P53蛋白通过影响基因转录,干扰DNA的起始,促进细胞的终末分化程序化死亡而发挥其抑制细胞增殖、转化,进而阻止细胞癌变。而P53基因突变产物即突变型P53，不仅失去了正常的抑癌作用,而且还有促进细胞恶性转化的作用，它的积聚与膀胱癌的分级以及肿瘤的增殖和进展密切相关。野生型P53蛋白半衰期仅6～20min,一般免疫组化方法难以检测出来,突变型P53蛋白半衰期较长,常在细胞核内聚积,因此,用免疫组化方法检测到的P53蛋白均为突变型P53蛋白[1]。Carlos等[2]用免疫组化法研究4
8、2例膀胱癌,结果发现26例标本中有P53蛋白的高表达。有研究表明P53蛋白阳性表达与膀胱癌生物学行为关系密切，而且随着肿瘤恶性程度的上升,P53表达阳性率也逐渐上升[3-6]。本实验研究发现,
